氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障抑制作用的初步观察及机制研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:LogiCrown
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白内障是一种发病率、致盲率均居当今国内外眼病之首的疾病,严重影响患者的视力健康和生活质量。研究其发病机制和药物防治,具有重要的意义和价值。流行病学及实验室研究表明,氧化损伤是其发生发展的主要机制之一。氢气是一种优质的抗氧化剂,可选择性中和强毒性活性氧自由基,具有干扰自由基的生成,清除已生成的自由基,调节细胞代谢活性,无毒副作用等优点。硒性白内障发病机制主要为氧化损伤,本实验通过建立硒性白内障动物模型来初步研究氢饱和生理盐水对亚硒酸钠性白内障的作用机制,为临床药物治疗白内障提供新思路。目的:初步研究氢饱和生理盐水对SD大鼠亚硒酸钠性白内障的影响及相关机制。方法:1氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障作用的初步观察选用7日龄健康SD大鼠68只,根据体重按随机数字表法把动物随机分为6组。分别为正常对照组(A,n=12),白内障组(B,n=12),氢水预防组(C,n=12),氢水全程治疗组(D,n=12),氢水晚期治疗组(E,n=12),氢水组(F,n=8)。白内障组、氢水预防组、氢水全程治疗组和氢水晚期治疗组大鼠12日龄按25μmol/kg体重单次颈背部皮下注射2mmol/L亚硒酸钠生理盐水。氢水预防组大鼠8日龄~12日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5ml/kg,每日1次,连续5d;氢水全程治疗组大鼠8日龄~17日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5ml/kg,每日1次,连续10d;氢水晚期治疗组大鼠17日龄~21日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5ml/kg,每日1次,连续5d;氢水组大鼠8日龄~17日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5ml/kg,每日1次,连续10d。于26日龄裂隙灯显微镜下观察大鼠晶状体混浊程度,测定晶状体中水溶性蛋白含量,SOD活性及GSH、MDA含量。所得数据进行统计学分析,以确定可能抑制白内障的作用时间。2氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障的影响机制的研究根据第一部分实验结果,进一步研究氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障的影响机制。选用7日龄健康SD大鼠60只,根据体重按随机数字表法把动物随机分为3组。分别为正常对照组(A,n=20),白内障组(B,n=20),氢水全程治疗组(C,n=20)。白内障组和氢水全程治疗组大鼠12日龄按25μmol/kg体重单次颈背部皮下注射2mmol/L亚硒酸钠生理盐水。氢水全程治疗组大鼠8日龄~17日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5ml/kg,每日1次,连续10d。于26日龄裂隙灯显微镜下观察大鼠晶状体混浊程度,测定晶状体中水溶性蛋白含量,SOD、CAT、Gpx、GR、GST活性及MDA、GSH、总巯基含量,以及视网膜中SOD、CAT、Gpx、GR活性及GSH、MDA含量。所得数据进行统计学分析。结果:1氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障作用的初步观察(1)晶状体混浊程度的观察:正常对照组和氢水组大鼠在整个实验过程中晶状体始终透明均为0级;白内障组16.67%(4/24)晶状体Ⅴ级混浊,83.33%(20/24)晶状体Ⅵ级混浊;氢水预防组25%(6/24)晶状体Ⅴ级混浊,75%(18/24)晶状体Ⅵ级混浊;氢水全程治疗组33.33%(8/24)晶状体Ⅲ级混浊,41.67%(10/24)晶状体Ⅳ级混浊,16.67%(4/24)晶状体Ⅴ级混浊,8.33%(2/24)晶状体Ⅵ级混浊;氢水晚期治疗组29.17%(7/24)晶状体Ⅴ级混浊,70.83%(17/24)晶状体Ⅵ级混浊。氢水预防组、氢水晚期治疗组与白内障组比较,晶状体混浊程度无明显差异,统计学检验结果显示差异无统计学意义(χ~2=1.06,P>0.05)。氢水全程治疗组与白内障组比较,晶状体混浊的发生发展相对延缓,混浊程度明显低于白内障组,统计学检验结果显示差异有统计学意义(χ~2=30.48,P<0.05)。(2)晶状体各项生化指标比较:各组晶状体中水溶性蛋白含量,SOD活性及GSH、MDA含量比较,白内障组、氢水预防组、氢水晚期治疗组较正常对照组、氢水组晶状体中水溶性蛋白含量,SOD活性及GSH含量均明显下降(P<0.05),氢水全程治疗组水溶性蛋白含量,SOD活性及GSH含量下降不明显,且明显高于白内障组(P<0.05),差异有统计学意义,但氢水预防组、氢水晚期治疗组水溶性蛋白含量,SOD活性及GSH含量较白内障组无明显改变(P>0.05);白内障组、氢水预防组、氢水晚期治疗组较正常对照组、氢水组晶状体中MDA含量明显升高(P<0.05),氢水全程治疗组MDA含量升高不明显,且明显低于白内障组(P<0.05),差异有统计学意义,但氢水预防组、氢水晚期治疗组MDA含量较白内障组无明显改变(P>0.05)。氢水组与正常对照组比较,生化指标无改变(P>0.05)。2氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障的影响机制的研究(1)晶状体混浊程度的观察:正常对照组大鼠在整个实验过程中晶状体始终透明均为0级;白内障组20%(8/40)晶状体Ⅳ级混浊,25%(10/40)晶状体Ⅴ级混浊,55%(22/40)晶状体Ⅵ级混浊;氢水全程治疗组5%(2/40)晶状体Ⅱ级混浊,25%(10/40)晶状体Ⅲ级混浊,45%(18/40)晶状体Ⅳ级混浊,15%(6/40)晶状体Ⅴ级混浊,10%(4/40)晶状体Ⅵ级混浊。氢水全程治疗组与白内障组比较,晶状体混浊的发生发展相对延缓,混浊程度明显低于白内障组,统计学检验结果显示差异有统计学意义(χ~2=44.06,P<0.05)。(2)晶状体各项生化指标比较:各组晶状体中水溶性蛋白含量,SOD、CAT、Gpx、GR、GST活性及MDA、GSH、总巯基含量比较,白内障组较正常对照组晶状体中水溶性蛋白含量,SOD、CAT、Gpx、GR、GST活性及GSH、总巯基含量均明显下降(P<0.05),氢水全程治疗组水溶性蛋白含量,SOD、CAT、Gpx、GR、GST活性及GSH、总巯基含量下降不明显,且明显高于白内障组(P<0.05),差异有统计学意义;白内障组较正常对照组晶状体中MDA含量明显升高(P<0.05),氢水全程治疗组MDA含量升高不明显,且明显低于白内障组(P<0.05),差异有统计学意义。(3)视网膜各项生化指标比较:各组大鼠视网膜中SOD、CAT、Gpx、GR活性及GSH、MDA含量比较,正常对照组、白内障组、氢水全程治疗组各项生化指标无明显区别,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.氢饱和生理盐水可减轻亚硒酸钠对晶状体的氧化损伤,对亚硒酸钠性白内障有一定的抑制作用,但无明显的预防作用,对于已形成的白内障无逆转作用,对晶状体无明显的毒性作用。2.氢饱和生理盐水可以提高晶状体组织中水溶性蛋白含量,SOD、CAT、Gpx、GR、GST活性及GSH、总巯基含量,减少MDA生成,从而减轻晶状体的氧化损伤,对亚硒酸钠性白内障的发生和发展有一定的抑制和延缓作用。3.氢饱和生理盐水对大鼠视网膜正常氧化还原状态的平衡无明显影响。创新点:首次探讨了氢饱和生理盐水对大鼠硒性白内障抑制作用及相关机制,为临床药物治疗白内障提供新思路。
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