【摘 要】
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目的构建靶向人NHE-1基因RNAi腺病毒表达载体,确定其感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值及其对SH-SY5Y细胞内pH值的影响。方法首先利用PCR检测目的基因人NHE-1在HEK-293细胞中的表达量,确定HEK-293细胞为干扰载体转染模型细胞;针对目的基因NHE-1及内参基因ACTB(Beta Actin)设计、合成荧光定量PCR引物三对,并对各基因以及各个引物进行PCR扩增条件优化,再依
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目的构建靶向人NHE-1基因RNAi腺病毒表达载体,确定其感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值及其对SH-SY5Y细胞内pH值的影响。方法首先利用PCR检测目的基因人NHE-1在HEK-293细胞中的表达量,确定HEK-293细胞为干扰载体转染模型细胞;针对目的基因NHE-1及内参基因ACTB(Beta Actin)设计、合成荧光定量PCR引物三对,并对各基因以及各个引物进行PCR扩增条件优化,再依次通过退火、连接,构建含NHE-1前体miRNA的重组干扰质粒pcDNAT
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背景与目的:氧化应激(Oxidative Stress,OS)及其引起的胰岛β细胞功能减退、数目减少及胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)在糖尿病发生发展中起重要作用。ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive Potassium Channels,KATP channels)将细胞新陈代谢与其兴奋性耦联,R从而调节胰岛素分泌。近来研究发现KATP通道的SUR1亚基是胰岛β
目的观察SD幼鼠多次腹腔注射不同剂量氯胺酮是否产生应激反应,以探讨不同剂量氯胺酮对SD幼鼠学习记忆和认知功能的影响及机制,为临床安全合理使用氯胺酮麻醉药提供实验依据。方法取21d龄SD幼鼠68只随机均分为四组:①腹腔注射小剂量氯胺酮25 mg/kg(A_1组),②腹腔注射麻醉剂量氯胺酮50mg/kg(A_2组),③腹腔注射同等量生理盐水(N组),上述各组每日注药1次,连续7d;④对照组(C组)不做
目的观察吡格列酮(Pioglitzone, PGZ)对5/6肾切除大鼠血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)与基质金属蛋白酶-9 ( matrix metalloproteinase-9, MMP-9)表达的影响,探讨其对肾小球硬化影响的可能机制。方法选取60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、PGZ组,每组20只,然后每组于8周和12
目的初步探讨外膜炎症所致动脉粥样硬化的机制及Rho激酶(ROCK1)在这一过程中的作用,并探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂--替米沙坦的干预作用。方法将32只健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(体重200--250g),适应性饲养1周后,随机分为以下4组:○1空白对照组(8只):正常饮食,普通饮水;○2动脉粥样硬化组(8只):单侧颈动脉硅胶管包裹,并给予正常饮食,普通饮水;○3替米沙坦低剂
目的观察阿托伐他汀(Atorvastatin, Ato)是否对谷氨酸(Glutamate, Glu)所致培养大鼠皮层神经元损伤具有保护作用,并探讨其作用机制。方法取出生24 h内Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取出大脑皮层,拨去软脑膜后,剪碎,用0.125%胰蛋白酶消化,应用DMEM/F12进行培养,培养7 d后用于实验。实验分为:空白对照组:加入等量培养基;谷氨酸组:加入谷氨酸(1
目的世界范围内每年大约有近50万的宫颈癌新发病例,因宫颈癌死亡的人数高达27万人。大量流行病学和分子生物学研究资料表明,人乳头瘤病毒(HPV)与子宫颈癌前病变密切相关,酯型儿茶素具有抗病毒、抗癌的作用。本研究的目的是考察酯型儿茶素对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响,制定出酯型儿茶素及其制剂酯型儿茶素阴道载体栓的质量标准,达到防治宫颈癌的目的。方法本研究使用MTT比色法检测酯型儿茶素不同浓度和不同作用
目的研究前列地尔(alprostadil,又名前列腺素E1,prostaglandin E1,PGE1)对兔主动脉内皮细胞缺氧复氧损伤后抗栓功能的影响及可能机制。方法采用体外培养的兔主动脉内皮细胞建立缺氧复氧损伤模型,实验分五组:正常细胞培养组(正常组);缺氧复氧损伤模型组(模型组);将PGE1分别加入缺氧复氧液中调整至以下终浓度,干预组不同剂量PGE1分别为:0.05μg/ml(小剂量组)、0.
目的探讨核因子-κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在七氟烷保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤机制中的作用。方法将40只SD成年雌性大鼠,随机平均分为4组(n=10):(1)假手术组(2)缺血再灌注组(3)七氟烷组(4)七氟烷-缺血再灌注组。假手术组、七氟烷组作为对照;缺血再灌注组和七氟烷-缺血再灌注组阻断支配大鼠肝脏左叶和中叶的门静脉造成约70%肝脏缺血再灌注模型,缺血1h、再灌注2h
目的观察再灌注早期给予N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)后处理和缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡及Fas/Fasl表达的影响,并探讨两者潜在的心肌保护机制。方法建立在体大鼠MIRI模型,48只大鼠随机等分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(I-postC组)、NAC后处理组(NAC组)。NAC组:夹闭大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血,