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目的:观察中药消异方对EMT大鼠异位子宫内膜形态学观察、NGF及其受体P75表达的影响,探讨中药消异方治疗EMT的作用机制,为其临床应用提供客观实验依据。
方法:选用9周龄的SD性成熟未交配雌性大鼠80只,体重200±20g/只,适应性喂养7天后于每日晨7点镜下观察其阴道涂片,建立大鼠动情周期档案。对动情期大鼠进行自体移植法手术造模,造模后4周,剖腹探查其异位内膜是否存活。选取造模成功的大鼠并随机分为8组进入实验,按以下方案给药:(1)空白对照组:自由饮食饮水。(2)假手术组:给予生理盐水灌胃,2ml/次,(3)模型组:给予生理盐水灌胃,2ml/次。(4)散结镇痛胶囊组:给予散结镇痛胶囊混悬液,含生药0.05g/ml/100g灌胃。(5)米非司酮组:给予米非司酮混悬液,含生药0.104mg/ml/100g灌胃。(6)中药消异方低剂量组:给予消异方低剂量,含生药1.125g/ml/100g灌胃。(7)中药消异方中剂量组:给予消异方中剂量,含生药2.25g/ml/100g灌胃。(8)中药消异方高剂量组:给予消异方高剂量,含生药4.5g/ml/100g灌胃。上述给药方法均采用每日一次,连续灌胃28天。于末次给药后24小时,用10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔过量麻醉处死,取出在位内膜和异位内膜组织,分别甲醛固定,石蜡包埋并切片(5um),分为2组,分别用于免疫组化NGF及其受体P75的检测。
结果:1.用药后4周,肉眼观察大鼠异位内膜体积模型组体积较大,米菲司酮组、散结镇痛胶囊组、中药低、中高剂量组,与模型组比较其异位内膜体积明显缩小,有明显差异(P<0.05)。2.光镜下观察发现模型组异位内膜生长旺盛,各治疗组均能使异位内膜腺上皮细胞萎缩,其中消异方高剂量使异位内膜腺上皮细胞萎缩的更明显。3.模型组异位内膜中NGF的表达水平明显高于米菲司酮组、散结镇痛胶囊组和中药消异方各剂量组(P<0.05)。4.消异方各组异位内膜P75的表达明显低于模型组(P<0.05)。
结论:1.本文阐述了活血化瘀,消瘾止痛法治疗子宫内膜异位症的学术思想。2.本实验采用自体内膜移植法,成功建立了EMT大鼠模型。3.消异方能有效抑制大鼠异位内膜的增生过长,其中消异方高剂量组疗效最好。4.消异方能降低大鼠子宫内膜NGF的含量,抑制异位内膜生成,以达到预防和治疗子宫内膜异位症的作用。5.消异方能降低大鼠子宫内膜P75的含量,能缓解子宫平滑肌痉挛性收缩,防治子宫内膜异位症引起的痛经。6.中药消异方各剂量对EMT模型大鼠均未产生不良反应。