目的：　　 先天性巨结肠症(Hirschsprungs Disease，HD)是小儿外科常见疾病之一，其发病率居先天性消化道畸形第二位，占存活婴儿的1/5000～1/2000。其主要临床表现胎粪排出延迟，顽固性便秘和腹胀，常并发小肠结肠炎，低位性肠梗阻，严重影响患儿的生活质量甚至危及生命。HD的发病机制目前尚未阐明，目前较为一致的观点认为患儿在胚胎期神经发育过程中神经嵴细胞迁移障碍，肠神经发育出现停顿，肠壁肌间神经丛的神经节细胞缺失，以致受累肠段异常收缩，其近端结肠代偿性扩张与肥厚，形成HD。　　 前期在国家自然科学基金课题(30772277)的资助下，利用双向凝胶电泳(Two-eimensional Electrophoresis，2-DE)技术，获得了分辨率较高的HD狭窄段及正常段肠管组织蛋白表达图谱，通过基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术，鉴定了39个差异蛋白质点，得到21个阳性结果。其中BMPs的上调蛋白与HD的发生关系密切。进而本研究选择其中的BMP-10与BMPR-1α进行研究。　　 骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Proteins, BMPs)属于TGF-β超家族亚家族，是一组具有类似结构的高度保守的功能蛋白，BMPs最早被发现是与骨骼系统的发育形成过程密切相关，而越来越多的研究表明，它广泛的存在于全身各种组织中，在胚胎发育、细胞分化、再生修复等方面也发挥广泛而重要的作用。目前有关BMPs在HD中的表达报道甚少，尤其BMP-10和BMPR-1α在HD肠管的表达及分布情况国内尚未见报道。本研究的目的是测定BMP-10和BMPR-1α在HD中的表达情况，探讨其在HD发生发展中的作用。　　 实验方法：　　 1、病例标本　　 收集2003至2011年经钡灌肠、直肠黏膜乙酰胆碱酯酶组织化学检查、直肠肛管侧压和术后病理切片证实的散发性HD狭窄段（为无神经节细胞段）和正常段（为有神经节细胞段）肠管组织标本50例，男35例，女15例，年龄0.5～3.1岁，平均1.5岁，长段型6例，短段型10例，常见型34例。　　 2、实验试剂　　 BMP-1多克隆抗体(兔抗人，试剂编号:AP1710a，ABgent Primary antibodycompany);BMPR-1α多克隆抗体（兔抗人，试剂编号:bs-1509R，北京博奥森生物技术有限公司）;反转录试剂盒(SuperscriptTMⅡ Rnase H ReverseTranscriptase);免疫组化染色试剂盒（北京博奥森生物技术有限公司）;全蛋白提取试剂盒（南京凯基公司）。　　 3、实验方法　　 利用荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹(Western Blot)和免疫组织化学方法检测HD狭窄段（无神经节细胞）和正常段（神经节细胞）肠管组织50例患儿BMP-10和BMPR-1α的表达，并对其表达进行定量与比较分析。　　 结果：　　 1、qRT-PCR实验结果　　 qRT-PCR发现BMP-10在HD狭窄段表达是正常段的3.09倍，BMPR-1α在HD狭窄段表达是正常段的1.28倍。差异有统计学意义（P＜0.05）。　　 2、免疫组化实验结果　　 免疫组化结果显示，BMP-10在HD狭窄段肠管中高表达，呈棕黄色;正常段肠管低表达，无色或淡黄色。BMPR-1α在HD狭窄段肠管中高表达，呈棕黄色;正常段肠管低表达，无色或淡黄色。　　 3、Western Blot实验结果　　 Western Blot结果显示， BMP-10在HD狭窄段肠管中蛋白相对含量364.55±20.03，在正常段肠管中蛋白相对含量为169.29±16.87，差异有统计学意义（P＜0.05）。BMPR-1α在HD狭窄段肠管中蛋白相对含量为261.19±27.61;在正常段肠管中蛋白相对含量为168.61±21.98，差异有统计学意义(P＜0.05）。　　 结论：　　 1、BMP-10和BMPR-1α基因在HD狭窄段与正常段肠管组织中的差异表达，可能参与HD的发生。　　 2、BMP-10和BMPR-1α指标的免疫组化染色可用于分析HD不同病变间的差异，有助于对HD的病理学研究。　　 3、蛋白印迹图像分析技术定量显示，在HD狭窄段肠管组织中蛋白表达水平明显高于正常段肠管组织，有助于对HD的临床诊断和病理诊断。