不同心肌保护方法对体外循环下胎羊心功能的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Freyr119
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目的通过观察比较St.Thomas停搏液(STH液)、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸停搏液(HTK液)和不停跳对胎羊实行体外循环(CPB)术中及术后心肌酶、心肌组织结构、代谢及实验中其它相关指标的影响,评估这三种方法对胎羊心肌的保护作用,寻求一种适合的胎羊体外循环心肌的保护方法,从而为临床胎儿体外循环提供依据。方法18只怀孕山羊(孕100—120 d,足月为150 d),重量为25.72±4.29 kg(17.5-32 kg),共孕有18只胎羊。分为3组:不停跳组(不停跳组),STH组(St.Thomas保护液组),HTK组(HTK保护液组)。3组胎羊均采用胸骨前正中切口,完全肝素化后建立CPB行主肺动脉-右心房插管转流,体外循环回路建立好后开始体外循环,其中St.Thomas保护液组和HTK保护液组在体外循环开始后,用主动脉钳夹闭主动脉开始灌流心肌保护液,不停跳组不灌流心肌保护液。控制胎羊体外循环流量在200 ml/kg/min以上,水箱温度恒定40℃。St.Thomas保护液组和HTK保护液组使胎羊心脏停跳30分钟,然后开放升主动脉在并行循环下使胎羊心脏复跳,30分钟后撤离体外循环,观察2小时,不停跳组转流60 min后停机观察2h。在CPB前、转流30min、转流60min、停机后1h、停机后2h采颈静脉血5ml,腋动脉动脉血1ml(测血气)。胎羊静脉血均在4℃下4000 rpm离心15min,取上清液,分装入EP管(每管约0.5ml),放入-80℃冰箱冻存。在停机后2h,胎羊静脉注射10%氯化钾5 ml,使心跳迅速停跳,剪取胎羊右心房心肌组织大小约1×1×1cm,置入含有4%福尔马林液的试管中密封保存于常温中,待1周后进行脱水、石蜡包埋,动物实验完成后用TUNEL统一染色观察细胞凋亡情况,剪取心室肌若干块,大小约0.5×0.5×0.5cm用于乳酸和ATP的检测。分别于转流前(T1)、转流30 min(T2)、转流60 min(T3)、转流结束后1h(T4)、转流结束后2 h(T5)测心率(Heart Rate,HR)、平均动脉压(Mean Artery Pressure,MAP)、体外循环转流量、PH值、PaO2、Pa CO2、碱剩余(Base Excess,BE)、K+、Na+、Ca2+、血糖(Glucose,Glu)、乳酸(Lactic Acid,Lac)、血红蛋白(Hemoglobin,Hb),在各个时间点采集胎羊静脉血检验心肌受损指标:CKMB、钙蛋白I(c Tn I)和肌钙蛋白T(c Tn T)。本次研究采集的所有数据均用SPSS21.0统计学软件处理,计量资料以均数±标准差(x±s)的方法表示。两组间差异显著性检验利用单因素方差检验(Student’s t-test),多组间显著性比较采用one-way ANOVA检验。结果1.三组胎羊在各个时间点腋动脉在测得的血气中,p H、PO2(mm Hg),PCO2(mm Hg)、K+(mmol/L)、Ca2+(mmol/L)在各时间点比较均无统计学差异(P>0.05)。在T3及T3以后的时段HTK组Na+(mmol/L)要低于STH组(P<0.05);在T3时,HTK组的K+(mmo/L)、Lac(mmol/L)、BE(mmol/L)浓度低于STH组(P<0.05);T4时,HTK组的Hct(%)高于STH组,有统计学差异(P<0.05)。2.体外循环之前胎羊血清c Tn T、c Tn I、CKMB浓度分别在三组间比较均无明显差异(P=0.430,P=0.391,P=0.071)。血清c Tn I(ng/L)浓度变化,在T1、T2、T3时三组间比较无统计学差异(P>0.05);T4时STH组的c Tn I较CPB前明显升高(P<0.05);T5时不停跳组与HTK组的c Tn I均较比CPB前升高(P<0.05);T4和T5时HTK组的c Tn I低于STH组(P<0.05);T4时STH组和T5时的STH组、HTK组的c Tn I高于不停跳组(P<0.05)。3.HTK组和STH组TUNEL阳性细胞数均较不停跳组组明显增多(p=0.001和p=0.048),但STH组TUNEL阳性细胞数较HTK组显著增多(p=0.007)。4.STH组心肌组织ATP含量较不停跳组与HTK降低(P<0.05);HTK组的乳酸含量高于不停跳组(P<0.05);STH组的乳酸含量高于不停跳组和HTK组(P<0.05)结论胎羊体外循环中,不停跳对心肌的保护明显优于停跳。在胎羊停跳方面与STH停搏液相比,HTK液在降低心肌代谢、减少心肌损伤标记物的释放方面有明显优势,TUNEL标记的细胞凋亡减少,心肌ATP含量有增加。HTK液的停跳时间要长与STH液相比可引起低钠血症。
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