论文部分内容阅读
目的：线粒体DNA (Mitochondrial DNA, mtDNA)在结构上缺乏组蛋白保护及相应的基因修复系统,其突变率远远高于核DNA且突变集中于D-Loop区,现已在多种常见的肿瘤中都发现了mtDNA突变。近几十年来据世界卫生组织定期公布的资料显示,全世界肺癌的发病率和死亡率明显增高,在我国肺癌也已成为癌症中的主要杀手,因此探讨非小细胞肺癌mtDNA中D-Loop突变有可能揭示肺癌的发生进而指导临床治疗,从而为肺癌的诊治带来飞跃。方法：收集20例非小细胞肺癌患者的癌及癌旁组织,采用碱裂解法提取其细胞的线粒体DNA,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增D-Loop区并进行测序,然后以人类基因组中mtDNA的D-Loop区序列为对照,对20例非小细胞肺癌患者的癌及癌旁组织细胞的(?)ntDNA的D-Loop区序列结果进行分析。结果：1.在20例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织mtDNA中,我们以基因库序列为标准,与基因库序列不同的作为基因变异,20例标本都发生突变,总突变数265个,其中癌组织特异性突变69个,癌旁组织特异性突变96个,共同突变50个2.区域分类中HVRⅠ区有77个突变,HVRⅡ区有151个突变,HVRⅢ区有17个突变,周边区有20个突变,突变主要集中于D-Loop的HVRⅡ区(151/265=56.98%)。3.同时出现于4位或者4位以上患者的高变位点有10个,突变率最高的位点是73和263位点,突变率为30%(6/20)。结论：1.线粒体DNA中D-Loop的突变主要集中于HVRⅡ区,在非小细胞肺癌的发生发展中可能有重要作用。2.突变率最高的位点是73和263位点,可为基因诊断作为参考。