目的:椎管内麻醉过程中可能会发生严重的神经系统并发症,而这些并发症的发生可能与局部麻醉药对脊髓的神经毒性作用有关。目前有关局部麻醉药的神经毒性明确作用机制仍无定论,诱导神经细胞凋亡可能是重要的因素。Fas/FasL是细胞发生外源性凋亡的重要途径,研究表明Fas/FasL在脊髓急性损伤所导致的神经细胞凋亡中扮演着重要的角色,但目前其在罗哌卡因诱导的脊髓损伤中的作用尚不明了。本课题旨在探究Fas/FasL所介导的细胞凋亡是否参与盐酸罗哌卡因诱导的脊髓损伤。方法:选取24只雄性SD大鼠随机平均分配至4组,并制作鞘内置管模型。术后观察3天,将造模成功的大鼠依据分组进行不同处理,生理盐水组:依据0.12ml/kg量鞘内于以注射生理盐水;0.5%组:鞘内于以注射等剂量的0.5%罗哌卡因;1%组:鞘内于以注射等剂量的1%罗哌卡因;2%组:鞘内于以注射等剂量的2%罗哌卡因。各组药物鞘内注射共8次,间隔为1.5 h。分别在模型制作前、鞘内给药前和鞘内给药后24h检测大鼠机械缩足阈值(Paw Mechanical retraction threshold,PMWT)的改变。完成所有PMWT检测后,采集处死大鼠并采集脊髓腰膨大段,分别进行苏木精伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察脊髓组织形态的改变,TUNEL染色检测每组脊髓细胞的凋亡情况,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测每组样本Fas、FasL、caspase-3和caspase-8在m RNA水平的改变,免疫组织化学染色和免疫蛋白印记检测各组脊髓中Fas、FasL、caspase-3与cleaved caspase-3的蛋白水平的改变。结果:各组大鼠模型制作前后PMWT无明显差异;与鞘内给药前相比,1%组和2%组在给药后24h的PMWT值明显上升(P<0.05)。HE染色显示:生理盐水组脊髓组织完整致密,细胞形态清晰良好。各罗哌卡因处理组中脊髓间质水肿程度程度随药物浓度增加而上升,1%组和2%组可见部分细胞核固缩、消失。TUNEL染色可见生理盐水组仅有少量的绿色荧光散在分布,凋亡细胞较少;而各罗哌卡因组,随着药物浓度的上升,凋亡细胞逐渐增多。高倍视野下生理盐水组的背角凋亡率低于各罗哌卡因用药组(均P<0.05)。而与0.5%组相比,1%组和2%组脊髓细胞凋亡率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。qPCR结果显示,与生理盐水组相比,各罗哌卡因处理处理组中Fas、FasL、caspase-3和caspase-8的m RNA表达随着药物浓度升高而上调,差异有统计学意义(P<0.05)免疫组织化学和蛋白印记结果显示,与生理盐水组相比Fas、FasL和caspase-3以及cleaved caspase-3在脊髓组织中的表达随着药物浓度的增加而上升(P<0.05)。结论:盐酸罗哌卡因可引起大鼠机械痛阈改变,并可诱导大鼠脊髓出现病理学损伤并伴有凋亡细胞增多。而罗哌卡因诱导大鼠脊髓细胞发生凋亡的机制可能和上调Fas/FasL表达相关。