宫颈癌及癌前病变中TSLC1基因CpG岛甲基化状态及其临床意义

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czh19890220
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目的:探讨宫颈癌细胞中抑癌基因——肺癌肿瘤抑制物(tumor suppressorin lung cancer-1,TSLC1)基因CpG岛甲基化状态与宫颈癌的发生发展的相关性及其临床意义。方法:(1)DNA提取采用TE9 DNA提取液及苯酚-氯仿抽提法提取慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、宫颈鳞癌及腺癌组织DNA。(2)亚硫酸氢钠修饰用EZ—DNA甲基化试剂盒对基因组DNA进行亚硫酸氢盐修饰和纯化:将非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。(3)甲基化特异性PCR(Methylation-Specific PCR.MSP)针对DNA亚硫酸氢钠修饰后的改变设计两套引物分别扩增以区分甲基化和非甲基化。(4)统计学分析用SPSS 10.0软件进行统计学分析,基因启动子甲基化与宫颈癌患者临床病理的关联分析用卡方检验,P<0.05显示差异有统计学意义。结果:宫颈癌中TSLC1基因CpG岛甲基化率66.2%(45/68)明显高于宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)43.3%(29/67)及慢性宫颈炎6.7%(2/29),三者比较差异有统计学意义(P<0.05);TSLC1基因CpG岛甲基化在临床Ⅰ期(48.4%)低于Ⅱ期(76.9%)和Ⅲ期(90.9%),三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。但宫颈鳞癌与腺癌TSLC1基因CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。在N分级(NO和N1)之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈癌中TSLC1基因启动子区过甲基化与其mRNA失表达有关,可能是宫颈癌发生、发展的原因之一,可作为宫颈癌诊断和预后分析的检测指标。
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