甘油磷酸胆碱的结晶、结构解析及年产100吨原料药工艺设计

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甘油磷酸胆碱(GPC)是磷脂酰胆碱(PC)分子上两条脂肪酸链完全被水解的产物,是人体内正常存在的水溶性小分子物质。同时它也是重要的神经传递介质乙酰胆碱(Acetylcholine)的生物合成前体,可以帮助脑部进行学习、记忆等活动,甚至是修复老年痴呆早期患者已部分受损的认知能力。本论文在实验室前期研究的基础上,首先对GPC的结晶工艺进行了研究。探讨两种制备GPC晶体方案,最终选择了将过氧化二铝后的GPC油状物粗品通过两步结晶法制备GPC纯品,纯度达99.5%以上,最优结晶条件为按乙醇体积与GPC质量2.5:1,70℃水浴溶解,0.22μm有机膜过滤,冰水浴30min降55℃,放0℃冰箱静置结晶28h得到一次结晶产品。将一次结晶产品重新溶解后进行重结晶,得到重结晶产品。结果分析显示,经过重结晶的GPC样品纯度达到药品的申报要求。根据小试实验确定了制备GPC晶体的主要工艺流程并进行了放大试验,放大实验结果和小试的实验结果基本相同。其次,对结晶获得的GPC纯品进行了结构分析。通过蒸发光高效液相、元素分析、DSC、核磁(1H-NMR,1H-1H COSY,13C-NMR,13C-DEPT,13C-1HHSQC,13C-1H HMBC,31P-NMR)、质谱(MS)、单晶衍射(XRD)以及结合文献信息,确定了GPC的结构。同时制备出GPC单晶,X-射线单晶衍射结果表明该化合物为正交晶系,P212121手性空间群,晶胞:a=7.08030(10)10-10m, b=11.4303(2)10-10m, c=14.8078(2)10-10m, α=β=γ=90.00°,对GPC晶型进行了补充,为今后的GPC在制剂中晶型的选择提供了参考。研究了GPC晶体制备过程中的杂质:通过考马斯亮蓝法(Bradford法)及紫外全波长扫描确定了GPC纯品中没有磷脂酶残留。利用蒸发光高效液相和原子吸收光谱确定了酶法制备的GPC粗品及一次结晶产品中含有杂质醋酸钠,为GPC以后生产过程中杂质控制提够了依据。依据以上实验研究得到的工艺数据,完成了年产100吨GPC原料工艺设计。本次设计是基于脂肪酶催化水解磷脂酰胆碱的成熟工艺来生产GPC的。通过实验过程探究,了解和掌握了酶法制备GPC工艺流程,确定了符合工业化生产的相关工艺参数,最终完成了对年产100吨成品GPC的工业化生产流程设计。设计过程是参照2010版GMP相关标准进行的,所以在设计过程中对设计相关的一些工艺操作等提出的要求是完全符合标准的。本设计旨在为今后大规模GPC的生产工艺设计奠定基础。
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