基于铜簇及碳点的比率荧光探针及其可视化检测应用研究

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金属纳米团簇由数个至数十个原子组成,而且由于其独特的电学、物理和光学性质而引起了相当大的研究热潮。与研究广泛的金纳米团簇和银纳米团簇相比,铜簇的的分析应用领域相对较为局限。到目前为止,铜簇的研究进展仍然处于早期阶段。碳点因其在低毒性、化学惰性、光可调谐、良好的水溶性和物理化学性质等方面显著的优点而受到越来越多的关注。由于碳点的这些优良的性质,它已被应用于许多领域,包括化学和生物传感,荧光成像和药物传递等方面。根据铜簇和碳点的优良的物理化学性质,本文设计了两种新型的基于铜簇与碳点的比率荧光探针的检测体系,并将其应用于生物分子的研究,其中主要研究内容如下:一、以水热法为基础,以N2H4·H2O为还原剂,溶菌酶为稳定剂,制备了铜簇。制备的铜簇呈蓝色发光,发光中心峰值为440 nm。在由铜簇、胆碱氧化酶、辣根过氧化物酶(HRP)和邻苯二胺(OPD)组成的混合物系统中,加入的胆碱由胆碱氧化酶催化产生H2O2。通过HRP催化H2O2氧化OPD,产生2,3-二氨基吩嗪(DAP)。作为OPD的氧化产物,DAP发出的荧光峰值在550 nm处附近,随着胆碱浓度的增加,荧光呈现逐步增强。同时,由于内滤效应诱导的荧光猝灭,铜簇的荧光由于DAP的吸收减弱。二、设计了基于碳点和铜簇的双发射的荧光探针。首先采用水热法制备了碳点,然后通过DNA模板法,以单链DNA为模板制备了具有红色荧光的铜簇。碳点通过静电结合作用与铜簇结合,形成双发射荧光探针。由于精氨酸和碳点的组合导致碳点荧光的静态猝灭。将对乙酰氨基酚添加到精氨酸-碳点/DNA-铜簇的复合体系中,由于精氨酸和对乙酰氨基酚之间的相互作用,精氨酸和对乙酰氨基酚的结合使碳点的荧光恢复。在该系统中,铜簇是作为参考信号,根据碳点的荧光强度和铜簇的荧光强度的比率,来检测系统中对乙酰氨基酚的浓度变化,建立对乙酰氨基酚的比率荧光检测体系。根据检测实验结果,CDs/DNA-铜簇双发射的比率荧光体系对于检测对乙酰氨基酚具有较高灵敏度和准确性。
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