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背景与目的：肺癌是目前发达国家乃至全世界危害最为严重的恶性肿瘤之一,浸润和转移是肺癌患者死亡的主要原因。本课题组的前期研究表明：去整合素-金属蛋白酶23(A Disintegrin And Metalloprotease23,ADAM23)在非小细胞肺癌中的表达与肺癌的恶性进展和转移有关,但其具体分子机制仍未明确。ADAM23属于ADAM家族,该家族含有去整合素区,并与基质金属蛋白酶共享“金属蛋白酶域”。这些分子可影响细胞-细胞粘附、细胞迁移、增殖等多种生物学行为,同时ADAM23作为一种抑癌基因,其表达缺失与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关。前期实验表明,非小细胞肺癌中,ADAM23表达下调后avβ3表达增高,二者可能在肺癌的浸润转移过程中发挥协同作用。上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是胚胎发育的一个重要过程,但它在癌症中的异常激活,是发生在恶性肿瘤浸润转移过程中的早期事件。与浸润转移相关的众多信号通路中,PI3K/AKT信号通路可被整合素αVβ3激活促进肿瘤的生长、侵袭、迁移能力。有文献报导,该信号通路的持续活化促进EMT的发生。AKT处在该信号通路的中心环节,活化的AKT在细胞生长、增殖、运动、细胞侵袭方面有重要作用。本实验发现,ADAM23表达下调后,可促进肺鳞癌细胞SK-MES-1的增殖、侵袭、迁移能力,同时pAKT表达上调,通过特异性阻断P13K后,研究细胞体外侵袭、迁移能力的变化。本实验旨在探讨沉默ADAM23对肺鳞癌细胞SK-MES-1增殖、侵袭、迁移能力的影响及机制研究。方法：(1)利用脂质体介导的转染技术,瞬时转染ADAM23-siRNA-1、2、3和Negative control到肺鳞癌SK-MES-1细胞,同时未经处理的SK-MES-1细胞作为空白对照,采用real time PCR方法检测ADAM23mRNA表达水平,筛选出抑制效果最佳的干扰片段；(2)瞬时转染ADAM23-siRNA-3、Negative control到SK-MES-1细胞,以未处理的SK-MES-1作为空白对照,采用western blot检测三组细胞中TWSIT、E-cadherin、α-SMA、vimentin的蛋白表达；(3)采用MTT比色法检测三组细胞的增殖能力；(4)transwell实验检测三组细胞的侵袭、迁移能力；(5)用western blot检测三组细胞AKT、pAKT、αv的蛋白表达水平,并分析其与ADAM23基因的相关性；(6)以ADAM23-siRNA-3处理后的SK-MES-1细胞为研究对象,将其分为三组,分别添加LY294002、DMSO,第三组不处理作空白对照,用、vestern b1ot检测AKT、pAKT、av的表达水平；(7)用、vestern blot检测P13K/AKT通路特异性抑制剂LY294002对TWSIT、E-cadherin、 α-SMA、vimentin蛋白的影响；(8)transwell实验检测LY294002对细胞侵袭、迁移能力的影响。结果：(1)ADAM23-siRNA-1、2、,3均可抑制ADAM23mRNA的表达,其中3号片段干扰效果最好；(2)与空白及阴性对照组相比,瞬时转染ADAM23-siRNA后,E-cadherin表达下调,α-SMA、vimentin、 TWSIT表达升高；(3)ADAM23低表达组的细胞增殖能力明显强于阴性对照及空白对照组(P<0.05)；(4)与空白及阴性对照组相比,ADAM23-siRNA处理组细胞的体外侵袭、迁移能力明显增强(P<0.05)；(5)与空白及阴性对照组相比,ADAM23-siRNA处理组AKT表达无明显变化,pAKT、av的表达均强于另两组；(6)LY294002处理后,该组AKT表达降低,pAKT表达缺失,av的表达无明显变化；(7)LY294002处理后,该组E-cadherin表达上调,α-SMA、vimentin、 TWSIT表达下调；(8)IY294002处理后,该组细胞体外侵袭、迁移能力明显下降(P<0.05)。结论：1.ADAM23表达下调后可以促进肺鳞癌细胞SK-MES-1的增殖、浸润和转移能力。2.ADAM23表达沉默后,可经PI3K/AKT信号通路影响肺鳞癌细胞的浸润转移能力。3.ADAM23可能通过与整合素αV之间的相互作用,激活PI3K/AKT信号通路促进肺鳞癌细胞的浸润转移。