口腔鳞癌血管内皮生长因子对树突状细胞影响的研究

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目的:通过检测口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell cancer,OSCC)患者外周血中树突状细胞(dendritic cell,DC)含量与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度,分析两者之间及其与OSCC临床病理特征的相关性;进一步观察体外VEGF对从外周血CD14+单个核细胞诱导的DC分化、成熟及其功能的影响,从而探讨OSCC患者免疫抑制的可能原因。 方法:采用流式细胞仪对88例OSCC患者(OSCC组)及49例口腔颌面部非炎症性良性病变者(对照组)外周血DC含量进行检测,并用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中VEGF浓度。在体外将健康人(献血者)外周血CD14+单个核细胞诱导培养成DC。细胞培养分成3组:PBMC组培养过程中不加任何细胞因子:DC组(常规诱导)于培养当天和第3天加入rhGM-CSF 100ng/ml、rhIL-440 ng/ml,第5天加入 rhTNF-α 20 ng-ml;VEGF-DC组(VEGF诱导)于培养当天和第3天加入 rhGM-CSF 100ng/ml、rhIL-440 ng/ml、rhVEGF75ng/ml,第5天加入rhTNF-α 20 ng/ml。用流式细胞仪分别检测3组细胞的表型;中性红吞噬法测定3组细胞的吞噬能力;甲基噻唑蓝(MTT)法观察3组细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的混合淋巴细胞反应(MLR)。 结果:OSCC组的血清VEGF浓度为(675.84±16.56)pg/ml明显高于对照 组(295.96±9.36)pg/ml(P<0.01),DC/PBMC比值(0.48±0.19)%和外周血DC含量(7.55±4.04)×106/L,明显低于对照组DC/PBMC比值(0.77±0.21)%和DC含量(13.11±3.65)×106/L(P<0.01)。其中OSCC患者外周血DC含量与血清VEGF浓度呈负相关(P<0.01),而两者与患者的性别、年龄和肿瘤分化程度无关(p>0.05),与肿瘤的TNM分期、原发灶大小、淋巴结及远处转移显著相关(p<0.05)。体外研究结果显示:与PBMC组相比,DC组和VEGF诱导组均无CD14的表达;与DC组(常规诱导)相比,VEGF—DC组(VEGF诱导)细胞的DC主要特征性标志CD1a(28.6%)、黏附分子CD40(21.4%)、辅助刺激分子CD80(46.7%)、CD86(59.2%)、成熟标志CD83(9.1%)及HLA—DR(44.7%)的表达降低(p<0.05):与DC组(常规诱导)相比,VEGF—DC组(VEGF诱导)细胞吞噬能力增强OD640值为(0.184±0.026),刺激T淋巴细胞增殖能力减弱OD490值为(0.285±0.015)(p<0.05)。 结论:OSCC患者外周血DC含量和VEGF浓度与OSCC的恶性程度密切相关,OSCC过量分泌的VEGF可能是抑制DC分化成熟的主要原因之一,其导致机体的免疫功能下降,从而使得肿瘤细胞逃避免疫系统的攻击。
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