目的探讨马尔尼菲篮状菌(TM)感染THP-1巨噬细胞后,去泛素化酶USP50对相关信号通路的影响及调控,了解宿主细胞抗TM感染固有免疫机制,为临床治疗TM感染提供依据。方法基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)对TM进行种属鉴定。佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞向THP-1巨噬细胞分化,PCR芯片技术筛选TM感染THP-1巨噬细胞后88种去泛素化酶差异表达基因,转录组测序技术筛选THP-1巨噬细胞感染TM后的Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)信号通路激活情况,Western blot分析去泛素化酶USP50、TLR4信号通路相关蛋白分子表达水平。利用慢病毒介导的过表达技术以及RNA干扰技术,构建高、低表达USP50基因的THP-1细胞,与TM孢子共培养,Western blot分析下游信号通路分子,ELISA检测TNF-α和IL-8细胞细胞因子分泌水平。结果PCR芯片筛选发现TM感染THP-1巨噬细胞后,去泛素化酶USP50上调表达最为明显,转录组测序显示TLR信号通路明显激活。TM感染THP-1巨噬细胞后,TLR4、USP50和TRAF6蛋白表达明显上调。USP50过表达增强了 NF-κB p65磷酸化,而RNA干扰可下调NF-κB P65磷酸化。TM孢子刺激THP-1巨噬细胞后,细胞培养上清中炎症因子TNF-α和IL-8分别在8h、18 h内显著升高(P<0.01)。下调USP50表达后,IL-8、TNF-α的分泌也受到抑制(P<0.01)。结论TM孢子刺激THP-1巨噬细胞后上调USP50、TLR4和TRAF6表达,而且USP50可正性调控NF-κB P65磷酸化。推测TM感染下去泛素化酶USP50可能通过TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路调控炎症细胞因子分泌。