肝癌是临床肿瘤化疗敏感性最差的恶性肿瘤之一，对抗肿瘤药天然耐药和化疗过程中产生的继发性耐药是其化疗敏感性差的重要原因之一。迄今，氟尿嘧啶类抗癌药及其衍生物目前仍是临床上治疗肝癌的首选药物之一。肝癌对该类药物的耐药又十分常见。迄今国内外尚无通过体外药物筛选建立该类药物肝癌耐药模型并进而探讨其耐药机理的研究报导。为此，我们首先研究了人肝癌Bel₇₄₀₂细胞株的天然耐药性及其机制，继而又以Bel₇₄₀₂作为亲本细胞，经过体外约6个月的多步骤连续5-FU筛选，得到了对5-FU耐药约161倍的5-FU耐药细胞系Bel_5-FU20000，并对其生物学特征及耐药机理进行了研究。旨在为临床克服肝癌耐药提供理论依据，并为筛选新的抗肝癌药及化疗增敏剂提供体外模型。在上述研究基础上，我们应用以上耐药细胞株及其他已知的MDR耐药株筛选耐药逆转剂，幸运地发现，XX中药粗提取物LCC及其单体LC，LCl，在体外对几种肿瘤多药耐药（MDR）细胞株有非常强的逆转作用。LC和LCl是一类与国内外现有的MDR逆转剂的结构完全不同的天然成分。至今国内外尚无他人报道LC和LCl这类基本骨架结构有逆转肿瘤耐药作用。本文将肝癌天然耐药及获得性耐药的机理以及LC化合物的逆转耐药作用的研究结果分述如下： 一．人肝细胞肝癌Bel₇₄₀₂细胞系内在耐药机制探讨 采用多种方法研究了人肝细胞肝癌细胞系Bel₇₄₀₂的内在耐药机制以及两种经典的多药耐药逆转剂维拉帕米（Ver）和尼莫地平（Nim）对内在耐药的逆转作用。结果如下：体外MTT实验表明，人肝癌细胞Bel₇₄₀₂对阿霉素（Dox），长春新碱（VCR）细胞毒性的敏感性分别比人口腔癌KB细胞低6倍，303倍。而5-FU对以上两种细胞系的细胞毒作用非常相近。免疫组化分析结果表明，对Dox相对耐药的Bel₇₄₀₂细胞表面P-糖蛋白（P-gp）染色阳性细胞数比对Dox相对敏感的KB细胞多，且染色程度加深，提示Bel₇₄₀₂细胞表面P-gp的表达多于KB细胞。本研究还发现，合用无毒剂量的钙拮抗剂Ver或Nim，均可显著增强Dox、VCR和紫杉醇（taxol）对Bel₇₄₀₂的细胞毒作用。而Ver对5-FU的细胞毒性仅有微弱增敏作用。合用Ver能显著增强Dox诱导Bel₇₄₀₂细胞发生凋亡的易感性。应用Hoechest33258染色Bel₇₄₀₂细胞核DNA后，激光扫描共聚焦显微镜观察到Ver与Dox合用