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该文探讨能否通过抑制TIMP-1的产生来阻断或减少对MMPS的抑制作用,达到降解过多堆只的ECM的目的的可能性,为临床肺间质纤维化的逆转治疗提供新的思路和方法.1、以博莱霉素诱导的肿间质纤维化大鼠为模型,探讨MMP-2、9和TIMP-1在肺间质纤维化发病中的作用.2、用ECORI将人TIMP-ICDNA全长从重组载体PCR2.1-TIMP-1中切下,T<,4>DNA连接酶将TIMP-1CDNA双向连接入PLXIND载体中,并转化感受态细菌H<,5>,将抗性克隆,用HINDIII和BSTX1双酶切鉴定TIMP-1的插入方向,获得PTS和PTAS,将PTS和PTAS包装到PA317细胞,收到上请,用0.45um的滤器滤过,储存备用.3、将表达timp-1正义和反义rna的逆转录病毒载体导入小鼠成纤维细胞nih3t3细胞系,并获得稳定表达正义和反义timp-1RNA细胞系,研究了正义和反义TIMP-1核酸对成纤维细胞生物学功能的影响.总之,该研究发现1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1在中均表达,表明MMP-2、MMP-9、TIMP-1参与与正常肺组织ECM代谢.2、在肺间质纤维化模型大鼠MMP-2MRNA早期表达增高、后期表达下降,TIMP-1MRNA在全过程持续高表达.提示细胞外基质积累可能与MMP-2后期表达降低以及TIMP-1持续高表达抑制MMP-2或其它MMPS的活性有关.3、反义TIMP-1核酸对MMPS和细胞外基质的表达并未产生直接的影响,但能抑制NIH3T3细胞的增殖及内源TIMP-1MRNA的表达,从而减少了ECM的合成及减少了对金属蛋白酶的抑制作用,使用细胞外基质降解,这对防止细胞外基质的堆积可能有极积作用.