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妊娠期高血压(Pre-eclampsia，pregnancy-induced hypertentioN,PIH)是妊娠期特有的严重的产科并发症。发生于妊娠20周以后，其发病率7％～10％。临床表现为高血压、蛋白尿、浮肿，严重时出现抽搐、昏迷、甚至母婴死亡，是导致孕产妇死亡和围生儿死亡的重要原因之一，对本病病因及发病机理的研究一直是科研的重要课题。其中胎盘滋养细胞缺血和血管内皮细胞损伤为其主要病理生理变化，研究已证实，妊娠期高血压患者免疫系统功能紊乱，Th1/Th2因子分泌失衡为其主要发病原因。细胞因子信号转导抑制因子(suppressors of cytokine signaling，SOCS)是近年发现的细胞因子的负调控蛋白，调控众多细胞因子和激素的信号转导，参与调控免疫应答及内分泌功能。SOCS-3为此家族的成员之一，动物实验显示，SOCS-3基因缺失小鼠，胚胎发育过程中，胎盘滋养细胞受损，导致孕13天内胎鼠全部死亡，表明SOCS-3是调控滋养细胞发育、分化的重要因素，课题组前期的研究结果显示，妊娠期高血压患者的胎盘中SOCS-3的表达下调，但是，SOCS-3与妊娠期高血压的关系尚不清楚。本研究拟探讨SOCS-3与妊娠期高血压发病之间的关系，旨在研究妊娠期高血压的发病机制，为临床防治措施提供依据。
方法：
采用基因重组技术构建SOCS-3/ZsGreen 1融合蛋白表达载体，磷酸钙沉淀法转染293TD细胞验证融合蛋白的表达；脂质体法转染人胎盘滋养细胞系（JEG-3），荧光显微镜观察转染效率，RT-PCR和Western Blot检测SOCS-3/ZsGreen 1 mRNA和蛋白的表达，转染48 h后，收集2h和6h细胞培养上清液，ELISA法检测IL-6水平；采用外源性IL-6作用于细胞后，收集上清液，检测IL-10的水平；电转法转染原代培养的人脐静脉内皮细胞，检测融合蛋白的表达同转染人胎盘滋养细胞系，用IL-6/IL-6R作用于细胞，收集上清液及细胞总蛋白，ELISA法检测磷酸化gpl30的表达，Western Blot检测磷酸化STAT3及非磷酸化STAT3和gp130的表达，验证SOCS-3在人脐静脉内皮细胞中对IL-6/gp130/JAK/STAT3途径的影响。同时，采用TNF-a作用于细胞，检测细胞表面粘附分子VCAM-1的表达，ELISA法检测细胞培养上清液中可溶性粘附分子VCAM-1的分泌，探讨SOCS-3对内皮细胞激活的影响。
结果：
成功构建SOCS-3/ZsGreenl融合蛋白表达载体，在293TD细胞中，融合蛋白分子量约为63 kDa。RT-PCR和Western Blot结果显示，在人胎盘滋养细胞系(JEG-3)和脐静脉内皮细胞中，与对照组比较，pSOCS-3/ZsGreenl转染组SOCS-3 mRNA显著增加并表达SOCS-3/ZsGreenl融合蛋白。在JEG-3中，SOCS-3/ZsGreenl转染组细胞分泌的IL-6减少，外源IL-6作用于细胞后能增加IL-10产生。在人脐静脉内皮细胞中，与对照组比较，pSOCS-3/ZsGreenl转染组可以抑制IL-6/IL-6R诱导的gp130和STAT3的磷酸化，而它们的非磷酸化蛋白表达水平未发现明显变化：同时pSOCS-3/ZsGreenl转染组降低TNF-a诱导的细胞表面VCAM-1和可溶性VCAM-1的增加。
结论：
1、在人胎盘滋养细胞中SOCS-3可减少细胞分泌IL-6。
2、SOCS-3增加人胎盘滋养细胞中IL-10的产生，表明在人胎盘滋养细胞中SOCS-3通过降低前炎性因子、增加抗炎性因子，发挥抗炎作用。
3、在人脐静脉内皮细胞中SOCS-3通过降低gp130和STAT3的磷酸化水平，进而抑制IL-6/gp 130/JAK/STAT3转导途径的激活。
4、SOCS-3可降低TNF-a诱导的人脐静脉内皮细胞粘附分子VCAM-1的表达及分泌，表明SOCS-3通过抑制内皮细胞的激活进而抑制其引发炎症发应，发挥抗炎作用。