沉默高尔基体P115基因对胃癌细胞凋亡的影响

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目的:探讨高尔基体囊泡转运蛋白P115表达抑制对胃癌细胞株凋亡的影响及其可能的相关机制。方法:运用含shP115基因片段真核表达质粒转染胃癌BGC细胞,免疫荧光显微镜检测细胞转染率,western-blot及RT-PCR检测P115、MIF在基因与蛋白水平的变化。利用western-blot检测细胞核内P53蛋白量的变化。流式细胞术及MTT检测细胞凋亡及活性情况。结果:与对照组细胞相比,P115shRNA组细胞的P115、MIF蛋白和基因表达水平都明显降低,细胞核内P53蛋白量明显增加(P<0.05);流式细胞术显示,与两组对照组细胞相比,转染shP115重组质粒的胃癌细胞凋亡数量显著增加(P<0.05);MTT结果显示转染组细胞增殖活性显著低于对照组,与对照组相比,shP115组在G1/G2期比例明显增加,S期比例明显减少(P<0.05)。结论:沉默高尔基体囊泡转运蛋白P115可以促进胃癌细胞的凋亡,其调控机制可能是通过调控MIF因子来完成的。
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