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蛋白水解酶(protease)是催化多肽或蛋白质水解的酶的统称，简称蛋白酶。广泛分布于动物、植物及微生物中，种类繁多。蛋白酶对机体的新陈代谢及生物调控具有重要作用。蛋白酶按水解肽链的部位可分为内肽酶(EC3.4 21-24，99)及外肽酶(EC3.411-19)。根据各种内肽酶作用位点的催化基团又可将之分为四大类，分别为丝氨酸蛋白酶，半胱氨酸蛋白酶，天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶。 组织蛋白酶(cathepsin，Cath．)是一大类对有机体的生命活动非常重要的半胱氨酸蛋白酶。组织蛋白酶通常指在酸性环境中被活化的蛋白水解酶。正常状态下，组织蛋白酶位于溶酶体，并可非特异性水解多种蛋白质提供有机体需要的氨基酸和能量。还可以参与有机体的其他生理活动，如骨质吸收和细胞凋亡等。如果组织蛋白酶异常表达，它们也可以引起病理反应。如通过降解细胞外基质蛋白，加速肿瘤细胞的迁移和扩散。 昆虫体内也有大量的组织蛋白酶分布，其中常见的为Cath．B、Cath．D和Cath．L，表达和分布部位多见于脂肪体组织、幼虫的消化道、早期胚胎、卵母细胞及幼虫的血细胞等。功能与昆虫的卵母细胞发生、早期胚胎发育、食物消化以及变态过程中组织的解体和重建有关。 棉铃虫(Helicoverpa armigera)属鳞翅目夜蛾科，是一种分布广泛、危害严重的农业害虫。本实验室已从棉铃虫卵中鉴定并纯化出棉铃虫组织蛋白酶B(H．armigera cathepsin B，HCB，EC 3.4．22.1)，并克隆了该酶的全长cDNA(GenBank AF222788)。HCB属于半胱氨酸类蛋白酶，酶原的分子量约为37kDa，成熟酶的分子量约为30kDa。该酶的最适pH为3.0-4.0，活性可以被半胱氨酸蛋白酶抑制剂反-环氧琥珀酰-L-白氨酰-(4-胍基)-丁烷(E-64)抑制。在此基础上，还进行了HCB的体外表达研究，制备了抗HCB的单克隆抗体，并进行了该酶的底物特异性和组织分布研究。已证实该酶参与了棉铃虫胚胎发育过程中卵黄蛋白水解、成虫脂肪体凋亡等生命活动，但对其在幼虫血细胞中的表达分布以及功能尚未进行研究。 本文在实验室原有工作的基础上，对HCB在棉铃虫幼虫血细胞中的表达分布和功能进行了初步研究。首先对棉铃虫幼虫血细胞进行了分类鉴定。利用吖啶橙和二碘化丙锭荧光染色法，微分干涉显微镜观察法，结合吉姆萨染色法在棉铃虫