病毒性肝炎(Viral hepatitis)是由肝炎病毒所致的一种以肝脏损害为主的全身性急性或持续性传染病。目前已明确的肝炎病毒至少有五种,即甲型、乙型、丙型、丁型和戊型,另外,己型、庚型和输血传播肝炎病毒(TTV)正在进一步确认。 在各型病毒性肝炎中,乙肝对人类健康危害最为严重,已成为我国最重要的公共卫生问题之一。目前全球约有 3 亿 HBV 感染者,我国属 HBV 感染的高流行区。据我国传染病报告和疾病监测网统计,乙肝占急性肝炎病例的 25%左右,与 HBV感染有关的肝病年死亡率约 23/10 万,其中肝癌死亡率为 13/10 万。 目前认为,病毒性肝炎引起的肝损伤主要由机体免疫应答所介导,当病毒激活机体免疫系统后,产生致敏淋巴细胞和特异性抗体,特别是病毒特异性细胞毒性 T细胞。它们不但能与体内病毒起反应而加以杀灭,而且也因受病毒感染的肝细胞表面带有病毒抗原而引起肝损伤,导致肝细胞变性肿胀和坏死。 现代医学的治疗战略正在从对抗疗法转向调节对策,从抗肿瘤、抗细菌和抗寄生虫的研究趋向于改善和促进机体防御能力的研究。这个发展方向,正是中医药的优势和特点。 清利疏补肝脾并调之剂是基于中医学对病毒性肝炎发病机理的认识,结合临床实践而总结出来的,具有清利湿热、疏肝养肝、调和脾胃、活血通络之功用,符合肝之病理特点,尤其病毒性肝炎的湿热内蕴、络脉瘀阻、肝郁脾虚之病因病机。 本研究对于深入探讨中医藏象理论、研制新的抗病毒性肝炎有效方剂,具有一定的指导意义和参考价值。 本论文主要分为文献综述、理论研究和实验研究三部分。 1. 文献综述:较为系统地总结了中医药治疗病毒性肝炎的研究概况,并对近十几年来肝损伤的发病机理及模型研究进行了总结评述。 2. 理论研究:主要从中医学对肝脏生理及病理特点的认识出发,对病毒性肝炎的病因病机进行了分析,并探讨了清利疏补肝脾并调法对病毒性肝炎的意义。具体内容分为五部分:一为中医肝脏生理功能及其特点;二为中医肝脏的病理变化及其规律;三为中医治疗肝病的法则及其特点;四为中医对病毒性肝炎的认识;五为治疗病毒性肝炎大法的确立。 3. 实验研究:本实验研究采用 D-氨基半乳糖胺(D-GalN)皮下注射制造化学性肝损伤模型,通过清利疏补肝脾并调之剂进行治疗,该方设大、中、小三个剂量,并用联苯双酯作为阳性对照。连续用药 7 天之后,除正常对照组以外各组小鼠皮下注射 D-GalN 复制化学性肝损伤模型,D-GalN 注射后 24 小时,摘眼球取血致死,进行以下指标的检测:应用光镜观察化学性肝损伤病理组织改变;血清生化检测肝功能——谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白(A/G)、总胆红素(TBIL);应用ELISA 法检测血清中 IL-6 及肝组织中 TNF-α的含量。 实验结果显示:正常组以上各项指标均正常,模型组各项指标检查明显出现异<WP=4>II 清利疏补肝脾并调法抗病毒性肝炎的理论及实验研究常,清利疏补肝脾并调复方大、中、小剂量治疗组、联苯双酯阳性对照组有不同程度的治疗作用,对不同指标作用效果不同。实验表明,清利疏补肝脾并调之剂各剂量组均有抗肝损伤的作用,其作用机理可归纳为以下几个方面: (1)降低转氨酶:转氨酶升高是肝细胞炎症的直接证据,清利疏补肝脾并调之剂可有效降低肝损伤小鼠血清转氨酶,起到减轻炎症,减少或抑制肝细胞大面积坏死的作用。 (2)保护细胞质膜:膜损害是肝细胞受损的最基本表现。细胞质膜受损时,膜通透性发生改变,影响细胞正常生理功能;当质膜失去完整性时,可最终导致细胞死亡。病理形态学显示,清利疏补肝脾并调之剂对损伤肝组织有保护作用。其机理可能是保护肝细胞的膜性结构不受破坏、减轻线粒体损伤和脂肪变性,促进肝细胞再生,恢复肝功能。 (3)改善肝细胞功能,消除肝细胞炎症:IL-6、TNF-α属于炎症介质,具有强烈的致炎活性,可引起肝组织的损害。清利疏补肝脾并调之剂可阻止 TNF-α,IL-6 参与肝损伤,从而起到保肝作用。 综上所述,清利疏补肝脾并调之剂具有抗病毒性肝炎肝损伤的作用,体现了中医扶正祛邪和整体调节的特色。其重视调整机体内环境,以恢复肝脾正常生理功能为要,与现代医学要求的阻断发病途径,修复病变相符合。但本研究对其作用机理仅做了初步的探讨,而其分子基因水平的详细机制,尚待进一步的探讨和研究。