亚低温干预下新生大鼠缺氧缺血性脑病时HIF-1基因表达变化及意义

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目的:新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxie-ischemicencephalopathy,HIE)是新生儿缺氧缺血后危及生命的疾病之一,对儿童生命健康造成很大的影响,现阶段在临床上对该病的治疗只有传统的支持对症。首先建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)动物模型,使用亚低温(mild hypothemia)处理,检测各组各时间点脑标本缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α)含量的变化。根据缺氧诱导因子-1α含量的变化,推断其促进细胞凋亡还是抑制细胞凋亡,为广大医务工作者治疗HIE开辟新的方法。方法:新生7天SD乳鼠120只,体重10-12g,雌雄不限,随机分为常温组、假手术组、亚低温组,每组各40只。常温组、亚低温组制备缺氧缺血性脑损伤大鼠模型,根据实验需要,按提取脑组织的时间点不同,将这三组再分成5个小组,各小组各8只:6小时组、9小时组、12小时组、24小时组、48小时组。结扎左侧颈总动脉进行造模,将结扎后的新生大鼠放在8%的氧气的密闭玻璃仓中2小时,制造动物模型。亚低温干预在模型制造成功后立刻进行。不同实验组分别于缺氧缺血性脑损后6小时、9小时、12小时、24小时、48小时时间点,处死大鼠,提取脑组织,对取出来的脑组织标本进行外观观察,观察脑标本形态,有无水肿,萎缩、液化、坏死等改变。实时荧光定量聚合酶链反应(real-timePCR,RT-PCR)方法对假手术组、常温组、亚低温组新大鼠脑标本缺氧诱导因子-1α的含量进行检测,对各组各时间点脑组织缺氧诱导因子-1α的含量进行统计学分析,得出统计结果,对统计结果进行分析。结果:(1)缺氧缺血性脑损后新生大鼠表现出异常的活动。(2)常温组在缺氧缺血性脑损伤后不同时间点脑组织,肉眼观可以看出其外观形态明显不同于正常脑组织,亚低温组在缺氧缺血性脑损后不同时间点脑标本外观形态与正常脑组织无明显改变。(3)缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的表达:假手术组各组之间HIF-1αmRNA无明显变化,表达甚微;常温组HIF-1α mRNA表达6h上调且逐渐增加,48h最高;亚低温组各组HIF-1α mRNA,6小时开始增加,与常温组各时间点比较均抑制(P<0.05)。结论:(1)新生乳鼠缺氧缺血性脑损伤经亚低温治疗后,可使脑组织损害的病理改变减轻,说明亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的脑组织起到保护效果。(2)新生乳鼠缺氧缺血性脑损伤时HIF-1α mRNA表达增强,亚低温干预下HIF-1α mRNA表达受抑制,起抗凋亡作用,从而说明亚低温对脑组织的损伤可以起到一定的保护作用,从而进一步为广大患儿带来幸福快乐生活的曙光。
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