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目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP-2)在三氧化二砷(As2O3)诱导的HEK293T细胞的凋亡中的作用和机制。
方法:将pIRES-GFP空载体、pIRES-GFP-SHP-2野生型和pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体通过磷酸钙方法转染HEK293T细胞;终浓度为5μmol/L的As2O3孵育48小时,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot方法检测Cyt-C,Caspase3,ERK,p-ERK,JNK及p-JNK的表达变化。
结果:流式细胞仪检测表明5μmol/L As2O3可诱导细胞凋亡,SHP-2可以抑制其作用;Western blot结果显示pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体组Cyt-C和Caspase3表达均高于空载体组,而pIRES-GFP-SHP-2野生型组的表达均低于空载体组;pIRES-GFP-SHP-2野生型组p-ERK表达高于空载体组,pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体组表达低于空载体组;p-JNK的表达pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体组表达高于空载体组,而pIRES-GFP-SHP-2野生型组低于pIRES-GFP空载体组。
结论:SHP-2可以抑制As2O3诱导的HEK293T细胞的凋亡,可能通过ERK和JNK途径对细胞的生存起到正向调节作用。