蝴蝶兰花瓣衰老过程中蛋白质差异表达研究

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本文以蝴蝶兰(Phalaenopsis)V3的花瓣为材料,采用差异蛋白质组学技术对其花瓣衰老过程中蛋白质差异表达进行了研究。结果如下:(1)建立蝴蝶兰花瓣蛋白双向电泳体系。对样品制备,蛋白溶解方法等进行了优化:采用改良的Tris-HCl缓冲液A法提取,含硫脲的水化液1:30复溶;获得了可识别约800多个蛋白质斑点的双向电泳图谱,采用改良的考马斯亮蓝染色,且重复性好、分辨率高。(2)研究了蝴蝶兰花瓣在黑暗条件下衰老过程蛋白质差异表达的变化,结果表明:31个蛋白在衰老过程中发生了可重复的表达变化,其中大部分(25个)是表达量的变化,只有6个蛋白(spot5001,5414,6307,1009,7304,6001)是质的变化;所有31个表达发生变化的蛋白点中,有5个蛋白点在T1(24h)和T2(48h)样品中表现出了相反的变化趋势,其余趋势一致;对26个差异较为显著的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱分析,共获得24个较好的二级质谱图,通过数据库搜索,其中有17个蛋白质得到了较为可靠的鉴定。这些蛋白质主要与能量代谢、蛋白质生物合成、蛋白降解和细胞周期调控等生物学功能有关。这些差异表达蛋白可能在蝴蝶兰花瓣衰老过程中发挥作用,本研究从蛋白质水平初步探讨了蝴蝶兰花瓣衰老过程中蛋白质差异表达的变化,为其花衰老的调控提供了理论依据。
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