长链多不饱和脂肪酸（Long-chain polyunsaturated fatty acids，LC-PUFA）一般指的是双键数≥3且碳链长度≥20的多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acids，PUFA）。其中具有重要生理功能的LC-PUFA主要有二十二碳六酸（DHA）、二十碳五烯酸（EPA）和花生四烯酸（ARA），它们都是生物体正常生长发育所必需的脂肪酸。一般认为，海蟹不具有将亚油酸和α-亚麻酸转化为LC-PUFA的能力。因此，DHA和EPA等LC-PUFA被认为是海蟹的必需脂肪酸。近年来，本课题组在拟穴青蟹（Scylla paramamosain）脂肪需求以及植物油替代鱼油方面开展了相关研究。研究结果发现，在饲喂紫苏籽油和红花油的青蟹的肌肉中，脂肪酸20:4n-6和20:5n-3的含量有轻微的提高。据此结果，我们推测青蟹自身可能具有合成LC-PUFA的能力。为验证我们的推测，本研究对青蟹合成LC-PUFA的关键酶基因进行了克隆，并对基因的组织表达和营养调节进行了研究。主要结果如下：　　1.采用RT-PCR和RACE-PCR方法，从青蟹中克隆到一个脂肪酸去饱和酶基因（GenBank登录号：KU975033），命名为Δ6 Fad-like。该基因的cDNA序列全长为1973bp，包含201bp的5’非翻译区，443bp的3’非翻译区以及1329bp的开放阅读框，共编码442个氨基酸。氨基酸序列与其它已克隆的甲壳类Δ6脂肪酸去饱和酶具有53％~80%的相似性，且具有典型的脂肪酸去饱和酶的结构特征。RT-qPCR结果显示：Δ6 Fad-like基因主要在肝胰腺中表达，而在其它组织中的表达量相对较低。养殖试验结果表明，随着大豆油替代鱼油比例的升高，Δ6 Fad-like基因在肝胰腺中的表达显著上调，说明了大豆油能促进该基因的表达。　　2.克隆到一个碳链延长酶4基因（GenBank登录号：KX454537），命名为Elovl4-like。该基因的cDNA序列全长为1119bp，包含58bp的5’非翻译区，44bp的3’非翻译区以及1017bp的开放阅读框，共编码338个氨基酸。氨基酸序列与已克隆的其它物种的延长酶4具有42%～47%相似性，且具有典型的延长酶的结构特征。RT-qPCR结果显示：Elovl4-like基因主要在肝胰腺中表达，而在其它组织中的表达量相对较低。养殖试验结果表明，随着大豆油替代鱼油比例的升高，Elovl4-like基因在肝胰腺中的表达显著上调，说明了大豆油能促进该基因表达。　　3.克隆到一个碳链延长酶基因，命名为Elovlm，又因该基因有两个亚型，故又分别命名为Elovlm1和Elovlm2。Elovlm1和Elovlm2 cDNA序列全长均为1529bp，包含75bp的3’非翻译区，389bp的5’非翻译区以及1065bp的开放阅读框，共编码354个氨基酸。RT-qPCR结果显示：Elovlm基因主要在胃中表达，而在其它组织中的表达量相对较低。养殖试验结果表明，随着大豆油替代鱼油比例的升高，Elovlm基因在胃中的表达显著上调，但对肝胰腺中的Elovlm基因的表达影响不显著。　　综上所述，本研究从青蟹中克隆到三个LC-PUFA合成关键酶基因，即Δ6 Fad-like、Elovl4-like和Elovlm。这些基因在肝胰腺和胃等组织中的表达水平较高，说明这些组织可能是青蟹LC-PUFA合成的主要部位。饲料中的大豆油能够显著提高青蟹LC-PUFA合成关键酶基因的表达水平。该研究结果对于丰富甲壳类营养学，特别是分子营养学内容等具有较重要的理论意义和学术价值，为进一步研究甲壳类LC-PUFA合成的分子机制提供了基础。