目的:探讨小檗碱改善糖尿病早期大鼠胃肠神经功能紊乱的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组,糖尿病模型组,模型灌胃给药组。禁食12小时后,链脲佐菌素（STZ）以65mg·kg^-1腹腔注射给药,72小时后尾静脉取血监测血糖值,超过16.70mmol·L^-1视为诱导糖尿病大鼠模型成功。模型灌胃给药组造模成功2周后,每天灌胃给予小檗碱(200mg·kg^-1),持续2周。采用HE染色法观察大鼠胃平滑肌的形态学改变;试剂盒检测胆碱能和氮能神经相关化学指标的变化,以及小檗碱对其的影响。运用电场刺激诱发神经源性反应及离体器官肌张力分析的方法,观察小檗碱对大鼠胃平滑肌神经功能的影响,并探讨可能的作用机制。结果:1小檗碱灌胃给药对糖尿病大鼠体重、血糖及胃底组织形态的影响1.1各组大鼠体重、血糖值的变化与同期正常组大鼠相比,糖尿病模型组、小檗碱灌胃给药组大鼠的体重明显低于正常组大鼠体重（P<0.01）;与糖尿病模型组大鼠相比,小檗碱灌胃给药组大鼠的体重无明显差异（P>0.05）。与同期正常组大鼠相比,糖尿病模型组、小檗碱灌胃给药组大鼠的血糖值明显升高（P<0.01）;与糖尿病模型组大鼠相比,小檗碱灌胃给药组大鼠的血糖值无明显差异（P>0.05）。1.2各组大鼠胃底组织切片HE染色各组染色清晰可见,细胞核与嗜碱性颗粒被染成蓝紫色,胞浆等组织呈桃红色。神经元胞体呈圆形或椭圆形或不规则形,集中分布于肌间神经丛,细胞核清晰可见,核仁明显。胞质内散乱的分布着嗜碱性细颗粒,即尼氏体。以正常对照组HE染色结果为参照,各组细胞核均匀分布在胃底平滑肌内,核仁清晰可见;糖尿病模型组的神经元细胞的胞体呈现空泡样病变,经小檗碱灌胃治疗后空泡样病变数量减少,然而各组胃底平滑肌中的神经元数量并未发生改变。2小檗碱灌胃给药对糖尿病大鼠胃肠神经递质NO及ACh相关酶的影响2.1蛋白标准曲线的绘制以蛋白标准品的浓度和各浓度所测定的OD值为横、纵坐标绘制蛋白标准曲线,求得蛋白标准曲线的方程为y=0.92x+0.042,R2=0.99。2.2各组大鼠胃底组织中tNOS活力和nNOS含量的变化与正常组相比,糖尿病模型组、小檗碱灌胃给药组大鼠胃底组织中的tNOS活力无显著性差异（P>0.05）。与正常组相比,糖尿病模型组大鼠胃底组织中的nNOS含量明显下降（P<0.05）;与糖尿病模型组相比,小檗碱灌胃给药组大鼠胃底组织中的nNOS含量无明显差异（P>0.05）。2.3各组大鼠胃底组织中ChAT、AChE活力和ACh含量的变化与正常组相比,糖尿病模型组大鼠胃底组织中的ChAT活力明显上升（P<0.05）;与糖尿病模型组相比,小檗碱灌胃给药组大鼠胃底组织中的ChAT活力显著性降低（P<0.01）。与正常组相比,糖尿病模型组大鼠胃底组织中的AChE活力明显下降（P<0.05）;与糖尿病模型组相比,小檗碱灌胃给药组大鼠胃底组织中的AChE活力无明显差异（P>0.05）。与正常组相比,糖尿病模型组大鼠胃底组织中的ACh含量明显增加（P<0.01）;与糖尿病模型组相比,小檗碱灌胃给药组大鼠胃底组织中的ACh含量无明显差异（P>0.05）。3小檗碱对大鼠离体胃底平滑肌神经源性收缩舒张反应的影响3.1电场刺激中抑制性神经递质NO与兴奋性递质ACh的相互作用L-arg100μmol·L^-1浴槽内给药明显降低电场刺激诱发大鼠胃底环行肌收缩反应（P<0.01）,并引发收缩幅度的紊乱;L-NAME10,100μmol·L^-1浴槽内给药可引起大鼠胃底环行肌的收缩反应显著性升高（P<0.01）。0.30μmol·L^-1卡巴胆碱预收缩标本后进行电场刺激,新斯的明0.01μmol·L^-1浴槽内给药明显抑制2Hz、4Hz、10Hz电场刺激引起的大鼠胃底环行肌的舒张反应（抑制率分别为13.8%,11.2%,14.2%,P<0.01）。3.2小檗碱、NOS抑制剂及AChE抑制剂对电场刺激诱发大鼠胃底环行肌收缩反应的影响1,10μmol·L^-1小檗碱、10,100μmol·L^-1 L-NAME和0.003,0.01μmol·L^-1新斯的明浴槽内给药,均浓度依赖性增加电场刺激诱发大鼠胃底环行肌收缩反应（P<0.05,P<0.01）。在10μmol·L^-1 L-NAME的存在下,10μmol·L^-1小檗碱可进一步增强电场刺激诱发大鼠胃底环行肌的收缩反应（P<0.05）。3.3钙离子通道阻滞剂对小檗碱作用的影响1μmol·L^-1苯氨氯地平和10μmol·L^-1西尼地平浴槽内给药均显著性抑制电场刺激引起的大鼠胃底环行肌收缩反应（抑制率分别为43.9%和44.7%,P<0.01）,并且完全取消小檗碱对收缩反应的增强作用。1μmol·L^-1苯氨氯地平明显抑制L-NAME、新斯的明引起的收缩反应的增强（P<0.05,P<0.01）。4小檗碱对大鼠胃底组织NOS及AChE体外活性的影响0.01^-1mmol·L^-1小檗碱对胃底组织中tNOS活力无明显影响（P>0.05）;10,100mmol·L^-1 L-NAME对胃底组织的tNOS活力明显降低（P<0.05）。0.01,0.10mmol·L^-1小檗碱浓度组对胃底组织中的AChE活力无明显影响（P>0.05）;1mmol·L^-1小檗碱体使胃底组织中的AChE活力显著性降低（P<0.01）;0.1,1μmol·L^-1新斯的明使胃底组织中AChE活力明显降低（P<0.05）。结论:1在STZ诱导的糖尿病大鼠早期,胃的兴奋性神经递质ACh合成增多消除减少、抑制性递质NO的合成减少,兴奋性和抑制性神经功能的平衡被打破;且ACh和NO功能之间存在负相关。2小檗碱纠正早期糖尿病大鼠胃底组织神经功能的紊乱,促进ACh的释放可能主要通过影响钙离子内流而发挥作用;而小檗碱灌胃给药对ACh和NO的合成及消除影响较小。