棉蚜(Aphis gossypii Glover)是重要的农业害虫,在我国北方它能随季节的变化进行周期性的孤雌生殖和有性生殖,即春夏以孤雌蚜进行无性生殖而大量繁殖,秋天产生性母,进而产生性雌,与雄蚜交配产卵,以卵过冬。虽然棉蚜的全生活史及生殖型转换(或生殖可塑性)方式已经明了,但其中的分子机制一直不清楚。目前研究蚜虫生殖型转换的一个模式是豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum Harris),与豌豆蚜不同,棉蚜有明显的性母并且转换寄主植物。之前我们实验室利用RNA-seq测定了棉蚜孤雌、性母、性雌三种生殖型的差异基因表达谱,通过GO聚类和KEGG通路分析富集出了光传导、孕酮介导的卵母细胞成熟、内分泌调节、以及表皮构成信号通路。本论文选择孕酮介导的卵母细胞成熟信号通路和光传导信号通路进行了初步研究。首先利用qRT-PCR对孕酮介导的卵母细胞成熟信号通路中的b ubl、 ccna2、polo、plkl 和 mad2基因进行了表达验证,bub1、ccna2和polo在孤雌中的表达水平显著高于性母。通过注射dsRNA对bub1、ccna2和polo进行了初步的RNAi实验,发现bubl或ccna2RNAi能够影响孤雌蚜的卵巢发育,但是否影响生殖型转换目前还不能确定。同时,也通过qRT-PCR测定了光传导信号通路中的ninac、opsin、arr2、GNB2、Trp和ANA基因从孤雌向性母转化过程中的时序表达模式,发现ninac、opsin、arr2和GNB2的表达水平在性母4龄若虫期显著上升。棉蚜个体小、体壁薄、体液多,有关棉蚜RNAi的报道很少,尚没有注射和饲喂dsRNA的比较实验。本论文对注射和饲喂dsR NA进行了系统的比较研究,包括注射位点、注射剂量、饲喂剂量、组织摄取、干扰效率等,对注射和饲喂dsRNA的优缺点进行了讨论。实验结果表明,注射位点在中胸与后胸之间,注射剂量10ng,饲喂浓度400 ng/μ l为宜。注射和饲喂的荧光(Cy3)标记siRNA都能够在卵巢和肠中检测到。