【摘 要】
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葡萄(Vitis vinifera L.)是最早实现基因组测序的果树,具有重要的营养、药用和经济价值。MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子在植物中广泛存在,主要参与调节植物生长发育、细胞形态建成,以及非生物胁迫反应。本研究基于欧洲葡萄基因组克隆获得了MYB基因序列,将其命名为VvMYB6。VvMYB6属于R2R3-MY
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葡萄(Vitis vinifera L.)是最早实现基因组测序的果树,具有重要的营养、药用和经济价值。MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)转录因子在植物中广泛存在,主要参与调节植物生长发育、细胞形态建成,以及非生物胁迫反应。本研究基于欧洲葡萄基因组克隆获得了MYB基因序列,将其命名为VvMYB6。VvMYB6属于R2R3-MYB类转录因子。通过对该基因的表达特性分析发现,VvMYB6基因可能与植物花药发育和逆境胁迫相关,进一步研究发现VvMYB6基因在烟草花药发育和抗逆性等方面具有重要功能。主要研究结果如下:1.VvMYB6基因序列长度为816 bp,包括1个内含子(96 bp)和2个外显子(133 bp和683 bp),N端含有保守的R2R3结构域,与VvMYBPA1、VvMYB5a和VvMYB5b亲缘关系较近。2.VvMYB6基因蛋白确定位于细胞核上,属于核蛋白。3.VvMYB6基因在葡萄花和叶片中表达量最高,其次为葡萄的根、茎和卷须。在花的发育周期中,花后5周该基因的表达水平较低,花后8周几乎检测不到。4.VvMYB6过表达转基因植株,是利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得的。5.除散粉期外,过表达VvMYB6转基因烟草和野生型烟草花药、花丝的形状大小没有差异,其中野生型和过表达VvMYB6转基因烟草中均有沿药室内壁径向生长的纤维带,但转基因烟草中完整的木质化纤维较少;在转基因烟草花药木质素生物合成途径中,Nt4CL、Nt COMT、Nt4C、Nt CAD14和Nt CCo AOMT关键酶基因表达下调,表明VvMYB6基因可能参与木质素合成的调控,从而导致花药的延迟开裂。6.在非生物胁迫条件下,与野生型相比,过表达VvMYB6转基因烟草的根长、鲜重达到显著差异(p<0.05),但烟草株高低于野生型;非生物胁迫下过表达VvMYB6转基因烟草叶片,蓝色和棕褐色斑点较少,并且颜色较浅。以上结果表明VvMYB6基因能提高烟草的抗旱、耐盐性。
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