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小麦是世界上种植面积最广的谷物，提供人类20%的消耗能量。小麦条锈病是由条型柄锈菌（Puccinia striiformis West. f. sp. tritici, Pst）引起的气传叶部病害，病原菌可通过气流在高空远距离传播，导致病害在不同的小麦产区流行，造成大幅减产。我国小麦条锈病发生面积广，危害严重。WKS1是小麦中克隆的第一个抗条锈病基因，可提供高温抗条锈性。研究发现，WKS1基因5’端第一个内含子携带多个结构域，包括发卡结构和microRNA潜在靶点等，可能对WKS1基因具有调控功能。为理解小麦抗条锈病基因WKS1的作用模式，本研究通过结构域的改造及小麦遗传转化，获得转基因植株，为分析WKS1基因第一内含子中结构域的功能奠定了基础。相关研究结果如下：1. GUS公共载体的构建根据研究需要，首先构建通用的GUS融合载体，该载体同时携带BAR和HPTII筛选标记。后续转基因植株可以通过除草剂（Basta）抗性和GUS染色进一步验证。2. WKS1:GUS融合表达载体的构建为研究WKS1第一内含子以及其携带的发卡结构和microRNA潜在靶点的功能，克隆了WKS1基因的相关区域，切换到入门载体pENTRY/D-TOPO，通过LR反应将WKS1片段重组到GUS公共载体，形成WKS1:GUS融合表达载体。融合表达载体A携带WKS1第一外显子、第一内含子和第二外显子；载体B与载体A相似，但第一内含子中microRNA的潜在靶点被删除；载体C与载体A相似，但第一内含子中的发卡结构被删除；载体D与A的差别是不包含第一内含子。3转化植株的获得以Bobwhite小麦为受体，共获得27棵候选转基因苗。其中，A载体15株、B载体7株、C载体1株、D载体4株。GUS染色和PCR检测表明，对应A、B和D载体分别有3、1和2株的转基因植株检测到WKS1:GUS的表达，这部分植株将用于进一步研究。