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目的:1、探讨Irisin对PA诱导的INS-1细胞自噬水平的影响;2、探讨Irisin是否通过影响PA诱导的INS-1细胞的自噬水平,从而影响INS-1细胞的分泌功能和凋亡水平。方法:培养INS-1细胞,将细胞分组为正常组、PA组、PA+100 ng/ml Irisin组(PA+I1组)、PA+500 ng/ml Irisin组(PA+I2组)、PA+1000 ng/ml Irisin组(PA+I3组)、PA+1500ng/ml Irisin组(PA+I4组)六组,通过用不同浓度的Irisin干预INS-1细胞,用Western blot观察自噬相关蛋白p-mTOR/mTOR、p62、LC3 II/I的水平,证明Irisin可以影响PA干预的INS-1细胞的自噬水平,并筛选出最佳的Irisin干预浓度。为了观察Irisin是否可通过自噬从而影响PA干预的INS-1细胞的胰岛素分泌功能和凋亡水平,将INS-1细胞分为正常组、PA组、PA+1500ng/ml Irisin组、PA+1500ng/ml Irisin+rapamycin组、PA+1500ng/ml Irisin+3-MA组。用3.3 mmol/L和16.7 mmol/L的葡萄糖浓度刺激检测干预后胰岛素的分泌水平,Western blot检测p-mTOR、mTOR、p62、LC3II、LC3I的蛋白水平,用mRFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:(1)与正常组相比,PA组LC3II/I的比值增高[(0.745±0.035)vs.(1.015±0.012),P=0.000],随着Irisin干预浓度的增加,LC3II/I的水平较PA组也逐渐升高且有统计学意义(PA+I1组1.465±0.028,PA+I2组2.269±0.063,PA+I3组1.858±0.074,PA+I4组2.355±0.074,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000),Irisin浓度为1500ng/mL时LC3II/I的水平最高。(2)与正常组比较,PA组INS-1细胞上清液中胰岛素水平在3.3 mmol/L和16.7mmol/L葡萄糖刺激下均下降[(0.447±0.067)ng/ml vs.(0.138±0.012)ng/ml,P=0.000;(0.625±0.041)ng/ml vs.(0.245±0.043)ng/ml,P=0.000],Irisin干预后胰岛素水平较PA组均升高[3.3 mmol/L:(0.138±0.012)ng/ml vs.(0.322±0.041)ng/ml,P=0.001;16.7mmol/L:(0.245±0.043)ng/ml vs.(0.414±0.036)ng/ml,P=0.005]。(3)与正常组相比,PA干预细胞后,自噬体数量增加[(2.33±1.53)vs.(10.33±1.53),P=0.000],而自噬溶酶体数量变化不明显[(2.33±1.53)vs.(3.33±1.53),P=0.939],Irisin干预后,自噬体数量和自噬溶酶体数量较PA组均升高[(10.33±1.53)vs.(15.67±1.53),P=0.007;(3.33±1.53)vs.(12±2.00),P=0.001]。(4)与正常组相比,PA干预后细胞凋亡率增加[(11.417±1.297)vs.(46.507±0.525),P=0.000],Irisin干预后凋亡率降低[(46.507±0.525)vs.(33.767±1.083),P=0.000]。结论:Irisin可通过作用于自噬溶酶体的形成影响PA诱导的INS-1细胞的自噬水平,从而改善INS-1细胞的胰岛素分泌功能和凋亡水平。