红鳍笛鲷荧光标记技术的研究

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本文以北部湾经济鱼类—红鳍笛鲷为研究对象,以从茜草根部提取的茜素的衍生物茜素红(ARS)和茜素配合指示剂(AC)作染色剂,采用化学荧光染色标记技术对其进行标记,同时研究了ARS与钙配合物的一些物理数据。本文旨在为日后红鳍笛鲷的增殖放流提供相关理论依据。论文主要研究结果如下:1.分别采用茜素红(ARS)和茜素配合指示剂(AC)浸泡标记红鳍笛鲷,分析比较了两种试剂对红鳍笛鲷的标记效果。实验得出:采用加药量为20~600mg·L-1的ARS浸泡红鳍笛鲷24~36h,或用加药量为100~300mg·L-1的AC浸泡红鳍笛鲷18h~36h后,可在实验鱼背鳍、鳞片、尾鳍处观察到的荧光标记。荧光标记效果与浸泡加药量和浸泡时间成正比,存活率与浸泡液加药量和浸泡时间成反比,所有标记组的标记率都为100%。综合考虑标记鱼的存活率、标记率和标记效果强度等因素,可得ARS的最佳标记加药量为300mg·L-1,AC的最佳标记加药量为200mg·L-1,最佳浸泡时间都为36h。养殖60d后,荧光标记依然明显可见,标记组鱼与空白组鱼的存活率、体长、重量无显著差异。2、本文对茜素红和茜素配合指示剂在海水中相关性质进行了研究,实验得出:ARS在海水中溶解量为30mg·L-1;在标记染色液中产生的沉淀主要成分为ARS与海水中游离的钙离子生成的配合物;100~300mg·L-1ARS海水溶液除去沉淀后剩余ARS含量约为30mg·L-1;CaCl2在100mg·L-1ARS水溶液中溶解量为30mg·L-1。3、采用紫外可见分光光度法研究了ARS与钙离子配合的性质。ARS与钙离子配合物在紫外可见光区507nm处有较大特征吸收峰;ARS与钙离子配合物的配合比为2:1,配合物的形式为Ca[ARS]2;配合物的平衡稳定常数K=5.0276×109。
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