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阿魏酸酯酶是碳水化合物酯酶亚家族的一种,能够水解植物细胞壁中阿魏酸与多糖间的酯键,打破它们的网状结构,释放出阿魏酸或阿魏酸二聚体。阿魏酸酯酶在阿魏酸的释放、生物合成、造纸工业、生产乙醇及动物饲料生产等诸多方面应用广泛。本论文主要从产阿魏酸酯酶乳酸菌的筛选、鉴定、酶学特性、菌株理化特性以及在苜蓿青贮中的应用等几方面进行了研究,结果如下。1.采用以阿魏酸乙酯为唯一碳源的平板透明圈法筛选到5株产阿魏酸酯酶的乳酸菌,并用高效液相色谱法测定其酶活。同时通过16S rRNA基因鉴定、系统进化分析及Species-specific PCR得知,5株乳酸菌分别为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)A1,短乳杆菌(Lactobacillus brevis)A3和3株乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)A2,A4,A5。2.分别对5株乳酸菌的阿魏酸酯酶粗酶液进行了酶学特性的分析,结果表明5株菌阿魏酸酯酶粗酶液的最适反应pH为6.4,最适反应温度为37°C,且在pH为5.0~7.0,温度为25~50°C的条件时,具有较好的稳定性。同时,对5株乳酸菌菌株的理化特性及糖发酵进行了研究,发现5株乳酸菌对生长环境具有较强的耐受性,在温度为10~45°C、pH 3.5~8.5及3%~8%浓度的NaCl条件下均可生长,而且,能利用大部分的糖源,对糖源的利用能力比较广泛。3.将筛选得到的产阿魏酸酯酶酶活较高植物乳杆菌A1(LP)和短乳杆菌A3(LBr),以及商品化植物乳杆菌(ALP),纤维素酶(CE)作为青贮添加剂添加到苜蓿青贮中,室温下青贮7d,30d,60d。发现所有添加剂处理组均显著降低了pH,乳酸含量增加(P<0.001)。但对青贮饲料中的蛋白降解未起到抑制作用。单独添加纤维素酶时,未能改善青贮饲料营养价值,且对纤维含量也没有影响。此外,只有在单独添加产阿魏酸酯酶的植物乳杆菌时降低了青贮饲料的纤维含量。综上所述,将产阿魏酸酯酶的乳杆菌应用到到苜蓿青贮中时,改善了苜蓿青贮品质,且添加植物乳杆菌降低了青贮的纤维含量。说明产阿魏酸酯酶的植物乳杆菌在青贮发酵的过程中降解了饲料纤维。与传统乳酸菌相比,不仅可以促进发酵,改善青贮品质,而且可以降低纤维,提高饲料的饲养价值。同时,为解决天然牧草低的含糖量、附着乳酸菌少、纤维降解率低、青贮成功率低等问题提供一定的技术支持,有效提高天然牧草的储存和利用。