论文部分内容阅读
近年来,抗生素在养殖业中的滥用现象円益突出,造成养殖动物机体抵抗力及生产能力下降、致病菌耐药性增强、动物类食品药物残留增加,引发诸多的食品安全问题,严重影响人类健康和养殖业的发展,因此,开发新型绿色环保的饲料添加剂己迫在眉睫。微生态制剂具有无毒副作用、无耐药性、无残留以及效果显著等诸多优点,已成为抗生素较为理想的替代品而被广泛应用。本论文以实验室选育的S.laterosporus S62-9为研究对象,体外评价其主要的微生态学特性,为其微生态制剂的开发奠定理论基础。主要内容如下:（1）测定了5.laterosporus S62-9在普通营养肉汤培养基中,37?C?240 r/min振荡培养条件下的生长曲线,结果显示,5./她rcw/wnw S62-9在0-4 h处于延滞期,之后进入对数生长期,到14 h左右逐渐进入稳定期,此后菌落数基本不再变化,符合微生物典型生长曲线的特征。（2）通过指示平板法测定了R laterosporus S62-9的抑菌谱,发现其对17’株细菌和2株真菌具有抑制作用,对G+菌的抑菌效果普遍优于0菌,对常见的致病菌如金黄色葡萄球菌、链球菌、单增李斯特氏菌和大肠杆菌的抑菌效果较明显,对益生菌植物乳杆菌不表现抑菌作用。（3）选取了1株藤黄微球菌28001（G+）和1株大肠杆菌CMCC 44752（G"）作为指示菌,通过液态共培养法研究5./如era印om?S62-9对2株菌的抑菌能力。结果表明,5./?/mw/wn?S62-9对2株指示菌均表现出强烈的抑菌作用,抑菌效果随其所占接种比例的增加而增强,抑菌机理包括营养竞争作用以及A laterosporus S62-9产生的抗菌肽的拮抗作用。（4）研究了B.laterosporus S62-9的耐热性以及对消化道环境的适应性,结果表明,B.laterosporus S62-9在85?C F水浴5 min,存活率达到（86.2±12.1）%;在p H 2.0的人工胃液中作用4 h后,存活率达到（857±1.1）%;在胆盐浓度为0.3%的人工肠液中作用4 h后,存活率高达（88.3±2.3）%。可见,B.laterosporus S62-9具有良好的耐热性,减少了制粒过程中的损失;且对消化道环境具有较好的耐受性,为其在肠道内定植并发挥功效提供了良好的先决条件。（5）体外模拟了B.laterosporus S62-9对Caco-2细胞的黏附作用,发现1个Caco-2细胞上平均黏附（20.7士3.0）个5.tomw/porm S62-9,与参考菌株相比,表现出良好的黏附特性,并且该菌营养体的黏附能力高于芽孢状态。（6）通过微量肉汤稀释法测定了B.laterosporus S62-9对7大类兽用抗生素的敏感性,结果表明,S./a/era年orwi’S62-9对常见的兽用抗生素均未产生耐药性,在生物安全性方面上被认为不存在可转移的抗生素耐药性基因,是安全的菌株。综上所述,B.toerayporws S62-9具有广谱、尚效的抑菌特性,具备良好的耐热性、消化道环境适应性以及黏附特性,不存在可转移的抗生素耐药性基因,因此,5.laterosporus S62-9初步具备开发为微生态制剂的标准和要求,可作为微生态制剂制备的优良菌种。