【摘 要】
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背景和目的:结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,结直肠癌肝转移是结直肠癌病人最主要的死亡原因,也是结直肠癌治疗的重点和难点。研究新发现miR-30b-5p参与调控肿瘤转
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背景和目的:结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,结直肠癌肝转移是结直肠癌病人最主要的死亡原因,也是结直肠癌治疗的重点和难点。研究新发现miR-30b-5p参与调控肿瘤转移过程,但其与结直肠癌肝转移之间的关系尚不明确。在此,我们研究miR-30b-5p在结直肠癌肝转移中的作用及分子机制。实验方法和结果:我们用慢病毒构建miR-30b-5p过表达的HCT116和Lo Vo细胞,发现过表达miR-30b-5p后结直肠癌细胞迁移和侵袭能力显著降低,细胞-基质粘附与运动受阻,Snail、Zeb1、p-Paxillin、p-Src等相关蛋白表达降低。生物信息学分析发现miR-30b-5p靶向调节Rap1b,我们用双荧光素酶报告实验证实Rap1b是miR-30b-5p的下游靶基因。过表达miR-30b-5p的结直肠癌细胞进一步过表达Rap1b后,细胞迁移和侵袭能力恢复,粘附与运动能力增强。敲减Rap1b的结直肠癌细胞迁移和侵袭能力明显下降,细胞形态皱缩,运动能力下降明显,与miR-30b-5p过表达后的现象一致。小鼠体内实验表明过表达miR-30b-5p能抑制结直肠癌细胞肝转移,Rap1b能减弱miR-30b-5p对结直肠癌肝转移的抑制作用。此外,我们用荧光定量PCR、免疫印迹以及免疫组化等方法检测,发现结直肠癌组织miR-30b-5p表达较癌旁组织显著降低,而肝转移组织中miR-30b-5p表达进一步降低,同时Rap1b表达增高,两者表达呈负相关。结论和意义:miR-30b-5p通过靶向调节Rap1b的表达,抑制结直肠癌细胞侵袭与转移。本研究为结直肠癌肝转移的治疗提供了新的靶点。
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