本文采用分子生物学技术结合生物信息学的方法对尼古丁去甲基化酶的结构和功能进行深入解析,有助于将来更好地理解尼古丁去甲基酶的酶促反应机制和开发高效尼古丁去甲基酶抑制剂。第一章,对尼古丁去甲基酶及其酶促反应机制、本文主要利用的分子生物学技术及计算机模拟相关软件进行介绍。第二章,利用cDNA末端快速克隆技术(RACE),以蓝茉莉叶烟草(Nicotiana plumbaginifolia)为试验材料,克隆一个新的尼古丁去甲基酶的全长cDNA序列。第三章,利用生物信息学分析软件及网络资源对获得的尼古丁去甲基酶基因序列进行基本性质、结构和功能预测。第四章,将尼古丁去甲基酶基因构建到表达载体上,导入酵母异源表达体系中进行表达。第五章,对尼古丁去甲基酶进行功能鉴定和酶学性质分析。第六章,利用同源模建、分子对接和定量构效关系分析(QSAR)的方法,从分子水平上研究尼古丁去甲基酶活性中心的结构与功能关系。本研究的结果为更好地理解尼古丁去甲基酶的结构和功能提供了理论参考。