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研究目的:本研究是基于本课题组前期对野菊花水提取物和不同浓度乙醇提取物对于湿疹模型小鼠皮肤具有不同程度的抑制作用研究结果而进一步提出,目的在于探寻野菊花水提取物及不同浓度乙醇提取物对湿疹动物模型的抑制作用的药效物质基础,对其提取物进行分离纯化获得单体化合物,并对其抗炎相关药理活性进行研究,以求能找到对湿疹有抑制作用的有效化学成分。研究方法:用蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇、50%乙醇四种溶剂在冷凝回流提装置内将野菊花的全冠状花朵干品进行浸泡,加热提取,浓缩提取液至冷冻干燥机冻干后得到野菊花固态浸膏。根据高效液相色谱仪(HPLC)和前期动物整体药效评价结果对蒸馏水提取物进行了主要单体化合物的分离和纯化,使用大孔树脂(HP20),反相硅胶(ODS),微孔树脂(MCI),葡聚糖凝胶(Sephadex-LH 20)等填料,实现单体化合物的分离纯化,随后采用ESI-MS/HR-ESI-MS、NMR、UV、IR、HPLC等波谱分析手段对获得单体化合物纯度及结构进行了确定,总共从野菊花水提液中分析鉴定出15个单体化合物(1号-15号),并采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外细胞炎症模型实验对上述单体化合物的抗炎活性进行了验证,主要观察细胞产生一氧化氮(NO)率的变化。研究结果:1.野菊花的水和95%、70%、50%浓度的乙醇水溶液提取物对小鼠湿疹急性期的局部皮损和免疫炎症有抑制作用,其中野菊花水提液的抑制活性最优。2.采用植物化学分离纯化手段从野菊花水提液中分离鉴定出15个化合物,其中1号化合物为新型葡萄糖苷倍半萜化合物,其余14个均为已知化合物,其中8个化合物(3号,4号,8号,10-14号)为首次从野菊花中分离而得;3.15个化合物的体外细胞活性筛选结果表明其中有三个化合物(2号,3号,7号)在100 μM浓度时均表现出对RAW264.7细胞产生NO率不同程度的抑制作用,3号和7号的半数抑制浓度(IC50)分别为36.09 μ M和9.59 μ M。由此得出,化合物2、3和7在野菊花水提物抗炎活性中发挥了一定药效作用,可能为其临床发挥治疗湿疹的关键成分之一。研究结论:1.野菊花外用有治疗湿疹的疗效,其有效物质主要存在于野菊花水提取物中,进一步从该提取物中分离鉴定得到15个化合物。2.野菊花提取物分离出的2、3、7号化合物为野菊花抗炎治疗湿疹的重要药效物质。