川芎嗪抑制双肾双夹高血压大鼠基底动脉重构的实验研究

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川芎嗪(ligustrazine)是从伞形科草本植物川芎根茎中提取的一种酰胺类生物碱单体,化学结构为四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine,TMP)。研究发现川芎嗪具有抗氧化应激损伤、抗炎性反应、抗钙超载、扩血管、改善微循环、抑制血小板聚集等作用,但对于脑血管重构方面的研究还不深入。因此,深入研究川芎嗪对高血压脑血管重构的影响,有助于进一步扩充该药药理机制。本研究旨在探讨川芎嗪对RHRSP大鼠基底动脉重构的保护机制。本文第一部分主要研究川芎嗪对RHRSP大鼠血压和基底动脉血管重构的影响。本研究选用RHRSP高血压大鼠模型,排除遗传因素干扰,单纯研究高血压进展过程中基底动脉血管重构的变化规律及川芎嗪对其的影响机制。本部分首先采取收缩压测定,并进一步研究高血压进展中ET-1、Ang II和NO水平的变化,提出川芎嗪降压机制可能与其降低血浆和基底动脉组织中ET-1、基底动脉组织中Ang II水平以及升高血浆和基底动脉组织中NO水平相关。接着,通过HE染色、EVG染色、血管环、FN免疫荧光、α-SM actin免疫组化和电镜观察超显微结构的方法分析高血压诱导的基底动脉血管重构的变化规律和川芎嗪对其影响的作用机制;进一步通过PCNA、Ki67免疫荧光、Brdu免疫组化方法研究川芎嗪对高血压诱导的基底动脉中膜平滑肌细胞增殖的影响。最后,通过PTEN免疫组化和western blot分析的方法,发现高血压进展与PI3K/AKT信号途径相关,川芎嗪可能通过减弱PI3K/AKT信号途径对抗基底动脉血管重构。第二部分研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞增殖模型的影响。本部分首先筛选体外模型ET-1或Ang II的最佳作用条件;进一步研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞增殖和细胞周期的影响,发现川芎嗪通过下调cyclin D1和上调P27使细胞周期阻滞于G1/G0期,抑制BASMCs细胞的增殖;接着研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞氧化应激的影响,发现川芎嗪可抑制BASMCs细胞的氧化应激反应;最后通过PI3K激动剂IGF-1确定川芎嗪通过减弱PI3K/AKT信号途径而抑制ET-1或AngⅡ诱导的细胞增殖和氧化应激反应。
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