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研究目的肺纤维化是在肺部疾病中常见的一种典型的病理特征。硫化氢（H2S）被认为是继一氧化氮和一氧化碳之后气体信号分子家族的第三个成员,它在包括炎症,代谢紊乱和血压调节等许多生理和病理生理过程中都起着极其重要的作用。我们前期的实验结果表明,H2S供体NaHS在在体和离体情况下都可以逆转博来霉素诱导的肺纤维化中发生的细胞衰老从而改善肺纤维化。本研究的目的是深入了解H2S通过抑制肺泡上皮细胞衰老改善肺纤维化的机制。研究方法构建CBS基因敲除小鼠,通过WB检测肺组织中P53、P21的表达,通过Masson染色观察肺组织纤维化的程度,然后利用免疫荧光观察肺组织中衰老相关蛋白P53、P21和SPC的共染情况。收集经博来霉素干预过的L2细胞的上清液作用于小鼠成纤维细胞（NIH3T3）。运用WB检测成纤维细胞中α-SMA和纤维黏连蛋白（Fibronectin）的蛋白表达,用PCR检测成纤维细胞中增殖特异性基因Aurkb、Ccnb1、Cdc25b和Foxm1 mRNA的表达。为了了解P53在博来霉素诱导的肺纤维化中的关键作用,使用P53抑制剂和硫化氢处理L2细胞,通过检测细胞中的P21蛋白表达和SA-β-gal衰老染色了解细胞衰老的情况。通过免疫共沉淀了解P53和MDM2之间的相互作用以及H2S处理后P53的泛素化降解情况。最后对经过BLM和H2S处理过的小鼠肺组织进行硫巯基化处理,明确H2S的硫巯基化作用。研究结果1)H2S合成酶CBS敲除使小鼠肺内P53和P21表达增加并诱导肺纤维化;2)H2S供体NaHS抑制ATII细胞和成纤维细胞之间的相互作用;3)P53抑制剂抑制P53/P21和SASP基因的表达减轻L2细胞衰老;4)H2S通过硫巯基化增强MDM2和P53的相互作用及P53的泛素化降解。研究结论H2S可以抑制NIH3T3的异常增殖,并通过使MDM2硫巯基化促进P53泛素化降解来改善细胞衰老从而逆转肺纤维化。