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研究背景:脂肪游离移植是一种前景光明的外科技术,可以用于软组织填充、修复重建和面部年轻化。但是移植的脂肪组织成活率低,而且脂肪移植后会被纤维组织和脂肪囊肿替代,限制了其更广泛的应用。显然,脂肪移植后失去血液供应是脂肪移植低成活率的主要原因。近来,细胞外囊泡在缺血性疾病中的作用引起了众多学者的关注。很多研究证实,骨髓间充质干细胞来源的细胞外囊泡可以促进血管生成。因此,我们设想使用BMSC-EVs辅助脂肪移植,通过BMSC-EVs促进血管生成的活性,减少脂肪细胞死亡,促进脂肪移植成活。目的:1)研究低氧培养条件对BMSCs分泌EVs能力的影响。2)研究BMSC-EVs对脂肪移植成活率的影响,并探讨其机制。方法:1)超速离心法提取BMSC-EVs,并使用扫描电镜、粒子径分析和流式技术对其进行鉴定。2)建立裸鼠脂肪移植模型,使用不同浓度BMSC-EVs辅助脂肪移植,12周取材;天平测量标本质量,排水法测量体积。3)建立裸鼠模型,使用BMSC-EVs辅助脂肪移植;1周后取材,通过qRT-PCR分析组织中PDGFA、PDGFA-R、TGF-β和VEGF的基因表达。结果:1)扫描电镜显示细胞外囊泡呈椭圆形、大小不一;粒子径显示,细胞外囊泡直径是228.4±28.8 nm;流式分析技术显示BMSC-EVs表面表达CD81、CD63、CD90和CD29,不表达CD31和CD45,证实其来源于骨髓间充质干细胞。2)骨髓间充质干细胞在低氧环境下分泌的细胞外囊泡的量是2.455±0.426 mg/10~6BMSC,明显高于正常氧气浓度下分泌的量0.523±0.098 mg/10~6 BMSC。3)肉眼观察,细胞外囊泡辅助脂肪移植组的标本明显大于对照组;经过天平称重、排水法测量体积证实细胞外囊泡可以促进移植的脂肪物成活。免疫组化可见,BMSC-EVs辅助脂肪移植组中CD31阳性的血管多于对照组。4)qRT-PCR检测显示,脂肪移植1周标本PDGFA、PDGFAR、TGF-β和VEGF在BMSC-EVs辅助移植组中的表达明显高于对照组。结论:1)低氧环境可以促进骨髓间充质干细胞释放细胞外囊泡。2)骨髓间充质干细胞来源的细胞外囊泡辅助移植,可以促进游离移植脂肪组织成活;该现象可能和它刺激血管生成的作用有关。