大豆11S和7S球蛋白提取及其凝胶显微结构研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:jiangyubojs
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目前大豆蛋白已广泛应用在食品方面,在非食品制品中也有较好的应用前景,但是在细胞组织工程的生物支架材料方面的应用研究鲜见报道。大豆11S和7S球蛋白是大豆蛋白的主要成分。本研究以低温脱脂大豆粉为原料提取得到大豆11S和7S球蛋白,对比研究两种方法(葡萄糖酸内酯作为凝固剂和加热)制备的大豆球蛋白复合凝胶凝胶特性和显微结构,进一步探索其与小鼠成肌细胞(C2C12)共培养情况。第一,大豆11S和7S球蛋白提取工艺优化研究,结果表明,豆粉浸提pH值8.5,离心后浸提液中添加0.08mmol/L NaHSO3,5 mmol/L CaCl2, pH值6.2提取大豆11S球蛋白。上清液调节pH值4.8离心提取大豆7S球蛋白。这种方法对比传统方法提高了两种球蛋白提取率和提取纯度,提取率11S达82.8%,7S达73.2%;提取纯度11S达78.3%;7S达71.1%。第二,研究两种制备方法对大豆球蛋白复合凝胶凝胶特性和显微结构的影响。TPA分析凝胶强度和弹性,扫描电子显微镜观察凝胶的显微结构以确定最优方法:11S/7 S比例和GDL浓度,分别为2:1和0.06 mol/L。第三,研究不同固定剂对凝胶硬度和显微结构的影响。结果表明,2.5%戊二醛和100%乙醇对凝胶硬度影响显著,但对凝胶显微结构影响不显著。第四,采用0.10mol/L NaOH、pH7.4磷酸盐缓冲液、0.10mol/L HCl三种降解液对凝胶进行降解,对凝胶的失重率进行测定,发现三种降解液均能不同程度降解凝胶,其中0.10 mol/L NaOH的降解效果最显著,经降解液降解六周后的凝胶均完全降解。第五,扫描电镜观察凝胶与C2C12共培养的情况,发现C2C12能够在大豆球蛋白复合凝胶支架上附着生长,细胞直径变小,并未呈现梭形。
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