结缔组织生长因子在低氧性肺动脉高压中的作用

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目的观察低氧性肺动脉高压形成过程中大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达变化,以及低氧对离体培养的人脐静脉内皮细胞分泌CTGF的影响,探讨CTGF在低氧性肺动脉高压中的作用。方法(1)将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和低氧组。以常压低氧复制肺动脉高压模型,右心导管插入法检测平均肺动脉压(mPAP);分别称量大鼠右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)的重量,计算出右心室肥厚指数RV/(LV+S);图像分析法测量肺小动脉管壁厚度和面积,计算出肺小动脉管壁厚度指标即管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%);原位杂交和免疫组化法观察肺小动脉CTGF mRNA及蛋白的表达,荧光PCR法观察大鼠肺组织CTGF mRNA的表达。(2)低氧处理离体培养的人脐静脉内皮细胞,采用荧光PCR法检测细胞中CTGFmRNA的表达,酶联免疫法检测细胞上清液中CTGF浓度。结果(1)与对照组比较,低氧组大鼠平均肺动脉压(mPAP)明显升高(P<0.01)、肺小动脉WT%、WA%以及RV/(LV+S)明显增加(P<0.01)。低氧组大鼠肺组织CTGF mRNA水平、肺小动脉CTGF mRNA及蛋白水平与对照组比较,CTGF mRNA表达则明显上调,肺小动脉CTGF蛋白水平明显增加(P<0.01)。相关分析显示低氧后大鼠肺小动脉CTGFmRNA及蛋白水平、肺组织CTGF mRNA水平与肺小动脉WT%和WA%均呈明显正相关(P<0.01)。(2)与对照组相比,人脐静脉内皮细胞在低氧培养6h后,其CTGF mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),低氧12h后上述指标明显增加(P<0.05),24h后其增加则更加明显(P<0.01)。同样,细胞上清液中CTGF在缺氧6h即有明显增加(P<0.05),12h达到高峰(P<0.01),24h稍有所下降,但仍高于常氧培养的细胞上清液中浓度(P<0.01)。结论(1)慢性低氧可以刺激CTGF的合成和释放,CTGF可能参与了低氧性肺血管重建过程。(2)低氧可以刺激离体培养的人脐静脉内皮细胞表达CTGF mRNA和分泌CTGF。
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