2016年冬季广东地区PEDV流行病学调查及IgY对仔猪PED防控的探讨

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猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性肠道传染病,其临床症状为呕吐、腹泻、脱水,该病多发于寒冷季节。猪流行性腹泻在世界范围内广泛流行,给养猪业造成了重大的经济损失。本实验收集了2016年冬季广东地区7个PEDV毒株,通过对其M基因和N基因序列测定,遗传进化分析及同源性比对,结果表明本实验中的7个PEDV毒株M基因之间的同源性为97.6%-99.9%,N基因之间的同源性为92.6%-99.4%。M、N基因与比利时经典毒株CV777的同源性分别为93.8%-94.8%、91.3%-95.8%,与中国弱毒株CH/S同源性分别为93.6%-94.6%、92.0%-96.5%,与韩国弱毒株DR13/virulent的同源性分别为93.5%-94.5%、92.8%-96.8%,与美国流行毒株USA/Colorado/2013的同源性分别为93.9%-96.1%、95.1%-99.2%,与日本流行毒株TTR-2/JPN/2014的同源性分别为93.6%-95.8%、94.9%-98.9%,与意大利毒株Italy/7239/2009的同源性分别为93.1%-94.1%、92.6%-96.5%,与德国毒株L00721/GER/2014的同源性分别为93.9%-96.1%、94.9%-98.8%。本实验的7个PEDV毒株与各参考毒株的同源性均在90%以上,表明广东地区PEDV毒株呈多样性的特点。当前针对猪流行性腹泻的防控方法较多,主要有疫苗免疫,返饲,口服碘制剂以及使用混合单抗、高免血清、卵黄抗体IgY等生物制品获得被动免疫力。到目前为止没有非常有效的疫苗来控制PED的发生,国内的疫苗以弱毒疫苗和灭活疫苗为主。为了探索有效的PED防控方法,本研究利用PEDV卵黄抗体IgY进行仔猪临床试验,探究PEDV IgY对仔猪流行性腹泻的防治效果。实验设计IgY预防组、IgY治疗组、阳性对照组和阴性对照组,IgY预防组在攻毒试验前3d每天灌服4mL IgY液体,IgY治疗组在攻毒试验后1d灌服4mL IgY液体,阴性对照组灌服等量的DMEM培养基。实验期间记录仔猪每天的体温体重情况,攻毒7d后解剖仔猪,荧光定量PCR检测各组排毒量以及仔猪小肠病毒载量,并检测仔猪血清中PEDV IgG和sIgA的抗体含量,通过组织学观察和免疫组化试验研究仔猪小肠病变情况。结果表明,攻毒1-2d后,IgY预防组及治疗组排毒量达到峰值;攻毒2-7d后,其排毒量逐渐减少;在攻毒7d后,IgY处理组小肠几乎检测不到PEDV,与阴性对照组进行差异性分析,差异不显著。血清中IgG和s IgA抗体检测差异不显著。组织学观察和免疫组化试验结果得知,IgY预防组以及其治疗组与阳性对照组相比没有明显区别,表明IgY对仔猪流行性腹泻的预防和治疗效果不理想。本研究通过加强饲养管理、有效的生物安全措施以及合理的免疫机制等综合防控措施,最终成功控制了PED,取得了良好的效果。
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