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目的:糖尿病大血管并发症是糖尿病患者致残、致死的主要原因,高糖引起的血管内皮功能损伤是大血管并发症的始动因素和病理生理学基础。西格列汀(sitagliptin)是一种二肽基肽酶-4 抑制剂(Dipeptidyl peptidase-4 inhibitor,DPP-4 inhibitor),近年来作为一种口服降糖药应用于临床。既往研究显示西格列汀除了具有降低血糖的作用,还可通过保护血管内皮细胞功能延缓动脉粥样硬化的发生,但作用机制不明确。自噬是近些年的研究热点之一,在糖尿病及其并发症的发生发展中发挥重要作用,但自噬在糖尿病大血管并发症发生发展中的作用及作用机制不明。本研究以糖尿病大鼠和高糖培养的人脐静脉内皮细胞为研究对象,观察西格列汀对血管内皮细胞的作用,并探讨自噬在其中发挥的作用,旨在为糖尿病大血管病变的发生机制和干预策略提供一定的理论支持。方法:随机选取8只5周龄SD大鼠标准饲料喂养,作为正常对照组。选取42只5周龄SD大鼠,高脂饲料喂养4周后予链脲佐菌素30mg/kg腹腔注射,1周后测随机血糖,连续两次随机血糖≥16.7mmol/l即为2型糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病组和西格列汀干预组。西格列汀干预组给予西格列汀 10mg/kg/d灌胃,另外两组予等量生理盐水,共干预12周,干预期间监测血糖和体重。实验结束后下腔静脉取血,检测血糖、血脂、VCAM-1水平;留取主动脉标本,H&E染色后观察主动脉形态学变化,TUNEL法检测主动脉内皮细胞凋亡,免疫组化和western blot法检测主动脉组织自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达,western blot法检测主动脉组织JNK、Bcl-2、Beclin-1蛋白表达。体外试验:高糖培养人脐静脉内皮细胞,并用不同浓度西格列汀进行干预,MTT法检测细胞活性,流式细胞学方法检测凋亡,免疫荧光和western blot法检测LC3Ⅱ蛋白表达。选择合适的西格列汀干预浓度,并予雷帕霉素激活自噬,观察细胞活性变化,并检测LC3Ⅱ、Bcl-2、Beclin-1蛋白表达。两组均数比较采用t检验,多组均数比较采用one-way ANOVA检验。结果:体内试验显示西格列汀干预可明显改善糖尿病大鼠的血管内皮损伤。糖尿病大鼠主动脉组织自噬水平增强,西格列汀干预后自噬水平明显下降,同时JNK-Bcl-2-Beclin-1通路蛋白表达水平改变。体外试验显示高糖培养的人脐静脉内皮细胞活性下降,凋亡增加,自噬增强。西格列汀干预可浓度依赖性的改善高糖培养人脐静脉内皮细胞的活性,减少其凋亡,并抑制内皮细胞自噬。予雷帕霉素激活自噬后,西格列汀对高糖培养人脐静脉内皮细胞的保护作用消失。高糖培养下,内皮细胞Bcl-2表达下降,Becin-1表达增加,西格列汀干预后内皮细胞Bcl-2表达升高、Beclin-1表达下降。结论:高糖可引起血管内皮细胞自噬过度激活,西格列汀可通过抑制内皮细胞自噬减轻高糖对血管内皮细胞的损伤。西格列汀可能通过JNK-Bcl-2-Beclin-1通路同时调节自噬和凋亡,发挥对内皮细胞的保护作用。