川芎嗪注射液干预紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛的实验研究

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目的为化疗药物紫杉醇导致的神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)建立理想的动物模型,观察川芎嗪注射液对紫杉醇所致的SD大鼠神经病理性疼痛的防治作用,同时检测其对大鼠中枢及外周神经系统中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的影响。方法15只成年雄性SD大鼠随机分为3组,每组5只,各组分别在第1、3、5、7日腹腔注入1.0、2.0mg·Kg-1·d-1紫杉醇或紫杉醇溶媒聚氧乙基蓖麻油(对照组),分别于用药前1日和用药后第3、5、7、12、16、20日检测实验动物机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),用药后第22日通过透射电镜观察各组大鼠坐骨神经的超微结构的改变;造模成功后,30只成年雄性SD大鼠随机分为4组,按实验一结果造模,4组大鼠在实验第1、3、5、7日腹腔分别注入一定剂量的化疗药物紫杉醇,A组(n=6)为对照组,第1~14天,B组(n=8)腹腔注入川芎嗪注射液200mg·Kg-1·d-1,C组(n=8)口服普瑞巴林3 mg·Kg-1·d-1,D组(n=8)同时腹腔注射川芎嗪注射液和口服普瑞巴林,剂量同B、C组。分别于用药前1日和用药后第7、12、16、20日测定大鼠MWT和TWL,用药后第22日通过透射电镜观察各组大鼠坐骨神经的超微结构,用免疫组化法检测大鼠腰膨大脊髓背角、相应背根神经节及坐骨神经中NGF的表达。结果腹腔注射紫杉醇之两组大鼠的MWT和TWL测定值均较对照组明显减低(p<0.05),并从实验第5天或第7天一直持续到实验结束,透射电镜见紫杉醇两组大鼠坐骨神经纤维髓鞘板层结构松散变形,严重变性,以2.0mg·Kg-1·d-1更为严重;相对于对照组,川芎嗪注射液组大鼠在第12天开始出现MWT测定值明显升高(均p<0.05),在第7天开始出现TWL测定值明显升高(均p<0.05),两项测定值在第22天实验完成时仍较对照组保持增高,B组和C组检测值无统计学差异;联合用药组MWT和TWL测定值升高水平较对照组及普瑞巴林单药组更为明显,差异有统计学意义(均p<0.05),坐骨神经电镜观察见用药组坐骨神经损伤均较对照组减轻,而且使用了川芎嗪注射液的两组神经损伤程度更轻;NGF检测发现对照组神经系统表达较其他三组明显增高,川芎嗪加普瑞巴林联合用药组较对照组减低了NGF的表达(p<0.05)。结论SD雄性大鼠重复腹腔注射紫杉醇2.0 mg·Kg-1·d-1可以成功建立化学治疗导致的神经病理性疼痛的动物模型;川芎嗪注射液能有效防治紫杉醇所致的大鼠神经病理性疼痛,降低机械刺激痛敏和热刺激痛敏,疗效不逊于常用于神经痛的抗癫痫药物;川芎嗪注射液与普瑞巴林还有明显的协同作用,作用机理可能是减低了中枢和外周神经系统中NGF的表达从而减轻神经损伤,是值得进一步研究的防治化疗神经病理性疼痛的中药。
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