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毛冬青(MDQ)为冬青科冬青属植物毛冬青(Ilex pubescens Hook.et Am)的干燥根,临床上广泛用于治疗心血管疾病和高胆固醇症等,有较好的疗效。毛冬青中含有多种活性成分,如已报道的毛冬青甲素,Pubescenoside A1和Pubescenoside A2等,均具有心血管方面的活性,但关于毛冬青提取物及其活性成分的药物代谢及动力学的报道不多。一、毛冬青中活性成分的分离本研究采用硅胶柱层析,葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱层析以及制备薄层等分离方法对毛冬青药材中的主要活性成分橄榄苦苷和反式丁香苷进行分离纯化,并采用核磁共振和质谱对化合物进行结构鉴定,其中反式丁香苷首次从毛冬青中分离得到。二、橄榄苦苷的体内代谢研究大鼠口服给予橄榄苦苷100mg/kg后,收集给药后大鼠尿液及粪便。通过液液萃取法处理样品,运用LC-MS/MS方法检测尿液和粪便中的代谢物。在粪便中发现橄榄苦苷及其5个代谢产物,其中橄榄酸,橄榄酸的葡萄糖苷为主要的代谢产物。在尿液中发现橄榄苦苷及其4个代谢物,橄榄苦苷苷元以及橄榄酸的氧化产物为主要的代谢物,说明水解反应及水解后氧化反应是橄榄苦苷在体内的主要的生物转化途径。橄榄苦苷的苷元及其甲基化脱氢产物,橄榄酸的葡萄糖苷以及橄榄酸的单氧化产物为大鼠排泄物中首次发现。三、毛冬青提取物大鼠给药后橄榄苦苷的药代动力学研究建立测定大鼠血浆中橄榄苦苷浓度的LC-MS/MS方法,并成功应用于毛冬青乙酸乙酯提取物通过口服和静脉给药后,橄榄苦苷在大鼠体内的药代动力学研究。大鼠给予毛冬青乙酸乙酯提取物后,于不同时间点采集血液。样品加甲醇沉淀蛋白后,直接采用液相色谱-质谱联用方法(LC-MS/MS)对血样进行含量测定。然后,采用WinNonlin数据统计软件分析其药代动力学参数,结果显示,大鼠静脉给予乙酸乙酯提取物200mg/kg后,主要药动学参数为：t1/2=0.133h, Cmax=5.44ng/μ1, AUC0-t=1.84ng·h/μl.然而在大鼠口服给乙酸乙酯提取物1g/kg后,仅在给药6小时时检测到橄榄苦苷(Cmax=137ng/ml)。四、橄榄苦苷在大鼠体内的排泄研究建立了尿样及粪样中橄榄苦苷的定量分析方法,首次对大鼠静脉和口服给药后,尿样及粪样中橄榄苦苷的累积排泄量进行研究。大鼠静脉给予乙酸乙酯提取物(200mg/kg)后36h,尿中的橄榄苦苷累积排泄量很低,为2.86±4.10μg,占给药剂量的0.072±0.102%,静脉给药后,原型药可能被广泛的代谢转化,导致尿样中检测到的橄榄苦苷原型药量很少。大鼠口服给予乙酸乙酯提取物(1g/kg)36h后,尿中的橄榄苦苷累积排泄量很低,为0.70±0.48μg,占给药剂量的0.003±0.002%。粪中的橄榄苦苷累积排泄量也很低,为2.20±1.31μg,占给药剂量的0.011±0.007%。上述结果说明,口服给药后,一方面橄榄苦苷在肝脏可能存在强烈的首过效应,另一方面原形药经过广泛的代谢转化,导致橄榄苦苷经口服给药后进入体循环的药量很少,体内血药浓度极低,尿样排泄量也会减少。