【摘 要】
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目的探讨重楼总皂苷(Rhizoma paridis total saponins, RPTS)对人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响及其对死亡受体通路相关蛋白caspase-3、caspase-8、Fas和FasL蛋白表达的影响。方
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目的探讨重楼总皂苷(Rhizoma paridis total saponins, RPTS)对人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响及其对死亡受体通路相关蛋白caspase-3、caspase-8、Fas和FasL蛋白表达的影响。方法以不同浓度(0、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL) RPTS作用于人胃癌MKN-45细胞12小时,采用AO/EB荧光染色法及Hoechst33258荧光染色法观察MKN-45细胞凋亡形态变化；采用流式细胞术(Annexin V/PI双染色法)测定细胞凋亡率；采用分光光度法测定MKN-45细胞caspase-3、caspase-8酶活性；采用Western blotting法检测Fas、FasL蛋白表达水平。结果(1)在荧光显微镜下,经RPTS处理的MKN-45细胞,可见典型的凋亡形态学特征,并在0-20μg/mL剂量范围内呈剂量依赖性。(2) RPTS作用MKN-45细胞12h,早凋和晚凋总凋亡率为26.06%。(3) RPTS作用于MKN-45细胞12h,其caspase-3、caspase-8活性均比对照组明显增高(P<0.01)。(4) RPTS作用于MKN-45细胞12h, Fas、FasL表达显著上升,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论(1) RPTS可以诱导肿瘤MKN-45细胞凋亡。(2) RPTS可以增强caspase-3、caspase-8酶的活性。(3) RPTS可以促进Fas、FasL蛋白的表达。(4) RPTS具有诱导MKN-45细胞凋亡的作用,其机制可能与Fas/FasL途径介导的死亡受体通路有关。
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