加味当归芍药散方对DM早期肾损害大鼠血清SOD和MDA的影响

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ying33809
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目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一,是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的主要死亡原因。本实验以链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)60mg/kg尾静脉注射复制糖尿病大鼠的动物模型,以血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)蒙诺(福辛普利钠片)为阳性对照药物,观察“加味当归芍药散方”对实验性糖尿病早期肾损害大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响,探讨“加味当归芍药散方”对糖尿病大鼠早期肾损害的保护机制,从而深化对糖尿病早期肾损害的认识,为临床防治糖尿病肾病的发生提供科学的实验依据和有效的预防措施,同时也为拓展经方的临床应用提供科学的依据。 方法:选取160~180g雄性Wistar大鼠60只,排除先天性糖尿病,随机抽取12只大鼠列为正常对照组(A组),余下的48只造模,大鼠空腹状态按照60mg/kg剂量一次性进行尾静脉注射配制好的STZ溶液。造模后第3、7天尾部取血测空腹血糖(FPG),选取FPG>11.1mmol/L且血糖值比较平稳的大鼠为DM大鼠,纳入实验;在成模的38只大鼠中除去FPG最高的和最低的,将剩下的36只随机分为模型组(B组)、中药组(C组)和西药组(D组)。中药组使用“加味当归芍药散方”水溶剂3ml(剂量为1.80g/kg/d,用生理盐水配成浓度为0.12g/ml的水溶液)灌胃;西药组使用蒙诺混悬剂3ml(剂量为1.0mg/kg/d,用浓度为0.2%的羧甲基纤维素钠配成浓度为0.07mg/ml混悬液)灌胃;正常组和模型组使用同体积生理盐水灌胃。各组大鼠均自由的饮水和进食,每天定时灌胃一次并且每周测各组大鼠的体重一次,以便调整药物剂量。4周后,用代谢笼收集24小时尿量,观察尿量(UV)的变化、24小时尿微量白蛋白(UALB)、β2-微球蛋白(Uβ2-MG);测定每只大鼠体重,非麻醉状态下进行去眼球取血并处死大鼠,测定血糖(FPG)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、血清丙二醛(MDA)、右肾重量计算出肾指数(RI)、血肌酐和尿肌酐并计算出内生肌酐清除率(CCr)。留取肾皮质标本进行光镜拍照、观察肾小球、肾小管和基底膜的形态结构的变化。 结果: 1.对血糖的影响:与正常组比,模型组、中药组、西药组血糖水平显著高于正常组(P<0.01),说明链脲佐菌素造糖尿病模犁成功。与模型组比,加味当归芍药散方从第2周开始有显著的降低血糖的作用(P<0.01)。 2.对早期肾损伤各实验室指标的影响:与正常组比,模型组uALB、CCr、uβ2-MG显著升高(P<0.01)。与模型组比,中药组可显著降低uALB、uβ2-MG(P<0.01),明显减低CCr(P<0.05);西药组显著减低uALB、uβ2-MG(P<0.01),对CCr无明显影响(P>0.05)。 3.对体重、尿量及肾指数的影响:与正常组比较,各组糖尿病大鼠RI和尿量均显著增高而体重显著下降(P<0.01),尤其是模型组大鼠;与模型组比,中药组和西药组均能明显降低RI和尿量(P<0.01),而体重中药组从2W,西药组从3W有显著的增加(P<0.01);而中西药组相比,第4W中药组的体重显著高于西药(P<0.05)。 4.对血清SOD的影响:与正常组比,模型组SOD的含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,中药组血清SOD可显著增高(P<0.01),西药组增高无显著性差异(P>0.05)。 5.对血清丙二醛(MDA)的影响:与正常组比,模型组血清MDA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药组血清MDA显著降低(P<0.01),西药组血清MDA降低(P<0.05)。 6.病理结果:正常对照组大鼠未见明显肾小球、肾小管及间质病变。DM组多数肾小球明显增大,肿胀,充血,肾小囊变窄,基底膜增厚,肾小球系膜区增宽,少数肾小球出现轻度硬化;部分肾小管出现细胞大、空泡变性,管腔变窄;肾间质部分小血管玻璃样变性。药物干预组的改变较轻,以中药组为最轻。 结论: 1.尾静脉注射STZ复制成DM的模型后四周,模型组糖尿病大鼠都出现了肾脏的损害。 2.“加味当归芍药散方”可以降低DM大鼠的血糖,改善一般症状,降低肾指数,减少尿量,增加体重,提高内生肌酐清除率,降低尿微量白蛋白和β2-微球蛋白的排泄,从而改善肾功能,防治糖尿病肾脏的早期损害。 3.“加味当归芍药散方”可升高DM大鼠血清SOD的含量而降低血清MDA的含量,减少高血糖引起自由基的生成和动脉硬化的发生,发挥抗氧化应激的作用,从而发挥对肾脏的保护作用。 以上是本实验继“‘加味当归芍药散方’对糖尿病早期肾损害大鼠TGF-β1及NO表达的影响”和“‘加味当归芍药散方’对糖尿病早期肾损害大鼠PKCα和ET-1表达的影响”,从氧化应激方面去探讨“加味当归芍药散方”对糖尿病早期肾损害的作用机制所得的结论,至于其深层次的作用机制,有待于今后的进一步研究。
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