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摘要：从银杏叶片分离纯化到两株解淀粉芽孢杆菌菌株Bacillus amyloliquefaciensHy7和Z2-13,前期研究报道表明,它们具有抑制真菌病害的活性。本研究采用平板对峙试验、离体生防试验和温室盆栽防病试验进一步测定了Hy7和Z2-13的脂肽类粗提物对供试的四种植物病原细菌的抑制能力和生防效果。平板抑菌试验结果表明,两个菌株的脂肽类粗提物对西瓜细菌性果斑病菌Acidovorax citrulli、辣椒软腐病菌Petobacterium carotovorum subsp. carotovorum、辣椒疮痂病菌Xanthomonas vesicatoria、柑橘溃疡病菌Xanthomonas axonopodispv. citri均有不同程度和效果的抑制作用；离体生防试验表明两个菌株的脂肽类粗提物能够有效地降低辣椒软腐病和疮痂病的发病率,第4d,辣椒疮痂病最高防效达到90.57%,辣椒软腐病最高防效达到70.84%,且防效持续时间长。温室盆栽试验表明两个菌株的脂肽类粗提物使西瓜细菌性果斑病的病情指数显著降低,第5d时防效达到最高,为61.19%。结果表明菌株Hy7和Z2-13具有较广谱的拮抗植物病原细菌的能力,为进一步的生物农药的开发奠定了基础。本研究再以芽孢杆菌Hy7和Z2-13基因组DNA为模板,成功扩增到fenAl基因片段,连接到pEASY-T5载体上测序。测序后对序列进行拼接,在BLAST上进行同源性搜索,用GenBank上数据进行比对分析,结果表明得到的fenAl基因片段与报道的序列同源性达到98%(1360bp),说明芽孢杆菌Hy7和Z2-13的DNA基因组存在fenAl基因。通过PCR扩增得到了KamC片段,用限制性内切酶HindⅢ和PvuⅡ双酶切,将KamC插入到fenAl基因上,通过同源重组技术成功构建了解淀粉芽孢杆菌Hy7和Z2-13的fenAl基因突变菌株。通过抑菌试验证明,fenAl基因突变的芽孢杆菌丧失了脂肽类物质的合成能力和对植物病原细菌的抑制作用。通过与野生型菌株的抑菌效果的对比分析,初步验证了芽孢杆菌Hy7和Z2-13fenAl基因的功能,即fenAl基因能够控制脂肽类的合成,该基因控制的合成的脂肽类物质对植物病原细菌病害有抑制作用。