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目的：随着临床上角膜胶原交联技术的广泛应用，交联后角膜生物力学增强，治疗扩张性角膜疾病的疗效得到普遍认可。然而部分患者角膜交联术后出现了一过性角膜混浊、无菌性浸润及角膜感染等并发症，这可能与角膜交联损伤了角膜基质细胞及免疫细胞有关。当胶原交联术后角膜炎症消退时，角膜免疫细胞是否恢复，角膜免疫状态及其对于真菌的抵抗力是否改变尚未明确。本研究通过对在体大鼠角膜进行真菌感染，比较真菌对交联炎症消退后角膜与正常未处理角膜的侵袭力差异，分析交联炎症消退后角膜的相关免疫机制。
方法：首先建立大鼠角膜交联模型，待处理后1月交联造成的角膜炎症完全消退时，将角膜交联大鼠与未处理大鼠用接触镜法联合0.1%氟米龙接种真菌，然后计数接种成功率。并分别于接种后1天、3天、7天进行裂隙灯拍照、角膜炎量表评分，之后处死实验动物，提取角膜组织，分别于3天时行角膜HE病理染色，接种前、接种后1天、3天、7天时行实时定量PCR、Western blot检测基因及蛋白水平MMP-9、IL-1β、MCP-1和VEGFA因子变化。最后用GraphPad Prism7.00软件进行数据图表绘制，SPSS25进行统计学分析。
结果：1）单纯接种组与交联后接种组感染成功率分别为82.61%、97.83%，交联后接种组感染成功率明显高于单纯接种组。2）接种后第1、3、7天交联后接种组角膜炎临床评分明显高于单纯接种组，表明交联炎症消退后接种白色念珠菌所引起的炎症反应更重，症状更明显。3）接种后第3天角膜HE病理染色结果显示，单纯接种组可见一个或多个局部病灶，局部炎症细胞浸润，有时可达深基质层，但病灶之间炎症细胞浸润明显减少；而交联后接种组，往往引起大面积炎症细胞浸润，甚至累及角膜缘，但浸润深度可能局限于前部基质。4）实时定量PCR结果和Western blot结果说明，相对于单纯接种组，交联后角膜在接种后第1天或3天其MMP-9、IL-1β、MCP-1和VEGFA角膜炎相关因子表达量有升高趋势。结合所有研究结果，可以得出以下结论，交联造成的炎症完全消退后，交联后角膜相对正常角膜仍更易感染白色念珠菌性角膜炎，且引起更严重的炎症反应。
结论：即使交联造成的炎症消退，交联过的角膜在接种真菌时仍更容易接种成功，并且引起的真菌性角膜炎症更严重。
方法：首先建立大鼠角膜交联模型，待处理后1月交联造成的角膜炎症完全消退时，将角膜交联大鼠与未处理大鼠用接触镜法联合0.1%氟米龙接种真菌，然后计数接种成功率。并分别于接种后1天、3天、7天进行裂隙灯拍照、角膜炎量表评分，之后处死实验动物，提取角膜组织，分别于3天时行角膜HE病理染色，接种前、接种后1天、3天、7天时行实时定量PCR、Western blot检测基因及蛋白水平MMP-9、IL-1β、MCP-1和VEGFA因子变化。最后用GraphPad Prism7.00软件进行数据图表绘制，SPSS25进行统计学分析。
结果：1）单纯接种组与交联后接种组感染成功率分别为82.61%、97.83%，交联后接种组感染成功率明显高于单纯接种组。2）接种后第1、3、7天交联后接种组角膜炎临床评分明显高于单纯接种组，表明交联炎症消退后接种白色念珠菌所引起的炎症反应更重，症状更明显。3）接种后第3天角膜HE病理染色结果显示，单纯接种组可见一个或多个局部病灶，局部炎症细胞浸润，有时可达深基质层，但病灶之间炎症细胞浸润明显减少；而交联后接种组，往往引起大面积炎症细胞浸润，甚至累及角膜缘，但浸润深度可能局限于前部基质。4）实时定量PCR结果和Western blot结果说明，相对于单纯接种组，交联后角膜在接种后第1天或3天其MMP-9、IL-1β、MCP-1和VEGFA角膜炎相关因子表达量有升高趋势。结合所有研究结果，可以得出以下结论，交联造成的炎症完全消退后，交联后角膜相对正常角膜仍更易感染白色念珠菌性角膜炎，且引起更严重的炎症反应。
结论：即使交联造成的炎症消退，交联过的角膜在接种真菌时仍更容易接种成功，并且引起的真菌性角膜炎症更严重。