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背景目前,在世界范围内,大约有2000万男性正在遭受着不育症的影响,是一个不容忽视的男性健康问题。不育症是一个典型的多因素疾病,如遗传因素、泌尿生殖道感染、免疫或内分泌疾病、氧化应激伤或内分泌紊乱等,而遗传因素是其主要病因。精子尾部多发畸形（MMAF）是一类因精子鞭毛主段超微结构异常而导致精子运动障碍,以致男性不育的罕见的畸形精子症疾病,患者除无生育力外,不伴有其他的临床特征。迄今为止,尽管国内外学者做了很多关于男性不育致病基因的研究,但只有少数基因已经正式报道与人类精子缺陷相关。目的1.采用全外显子组测序技术对来自近亲婚配家系的精子尾部多发畸形患者进行致病基因的鉴定。2.探讨DNAH1、CFAP43、CFAP44基因新的突变位点在精子尾部多发畸形发生中的致病作用。方法选取2016年1月-2017年10月年于安徽医科大学第一附属医院妇产科生殖中心行ART治疗或于男科门诊就诊的20例来自近亲婚配家系精子尾部多发畸形患者及精子形态正常的对照人群为研究对象,抽取所有研究对象的外周血并留取精液标本,以便后续行DNA提取、PCR、全外显子组测序、Sanger测序、精液常规及形态学检查、HE染色、透射电子显微镜检查等。该项临床治疗研究已经我院伦理委员会批准,并且所有受试对象均签署患者知情同意书。结果在20例来自近亲婚配家系的精子尾部多发畸形患者中,发现8例MMAF患者存在基因突变,包括3个DNAH1突变位点,分别为c.1832 T>C（p.L611P）、c.1172611727del（p.P3909fs）、c.12122 C>T（p.T4041L）,4个CFAP43突变位点及1个CFAP44突变位点,分别为c.11401143del（p.Lys381Profs*）、c.739A>T（p.Lys247*）、c.1474G>C（p.Glu492Arg）、c.4600C>G（p.Leu1534Val）、c.4963C>T（p.Arg1655*）。Sanger测序结果进一步证实了全外显子组测序结果的可靠性。透射电子显微镜下,健康男性的精子鞭毛轴丝具有完整的“9+2”（9对外周微管二联体+2个中央微管）超微结构,而精子尾部多发畸形患者常表现为外周二联微管结构紊乱、中央微管及径向轴辐的缺失,这与光学显微镜下所观察到的结果相一致。Cfap44基因敲出小鼠睾丸组织乙酰-Tubulin免疫荧光及HE染色结果表明,与野生型小鼠相比,Cfap44基因敲除小鼠tubulin荧光信号极其微弱,且HE染色睾丸组织中的精子数量也明显较野生型小鼠睾丸精子少。结论精子尾部多发畸形是一种隐性遗传疾病,我们通过全外显子组测序技术在20例MMAF患者中共发现8个新发突变位点,包括3个DNAH1突变位点（c.1832T>C、c.1172611727del、c.12122 C>T）,4个CFAP43突变位点（c.11401143del、c.739A>T、c.1474G>C、c.4600C>G）及1个CFAP44突变位点（c.4963C>T）,这些新发突变位点可以为患者的遗传咨询奠定分子基础。