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目的:前列腺癌是男性泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,其起病隐匿,早期缺乏典型症状,疾病被确诊时多已经处于T3、T4分期甚至更晚,失去最佳手术机会。目前对于局限性晚期的前列腺癌以及复发性和转移性的前列腺癌主要采用雄激素阻断方法治疗,但随着激素阻断时间的延长,绝大多数前列腺癌会逐步进展为激素非依赖性前列腺癌(androgen independent prostate cancer,AIPC)。继续雄激素阻断治疗或者采用一线、二线化疗、放疗等均难以达到理想效果。蛇床子素(osthole)是一种从中药蛇床子中提取的具有生物活性的香豆素,已被发现在多种恶性肿瘤的治疗方面具有显著效果,但目前在前列腺癌的防治方面研究较少。本实验采用蛇床子素在体外对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞进行干预,研究蛇床子素对PC-3细胞的增殖以及细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制及成为抗前列腺癌新药的潜力。方法:在体外对PC-3细胞进行培养,采用浓度不相同的蛇床子素对实验组进行处理,并设置对照组。通过MTT比色法检测各个实验组的PC-3细胞经过不同浓度蛇床子素干预后,其增殖随着作用时间延长的变化情况。流式细胞技术检测实验组PC-3细胞经各浓度蛇床子素干预后,其细胞周期分布及细胞凋亡的变化情况;通过蛋白印迹法对蛇床子素干预PC-3细胞后,磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)二个亚基p85、p110的表达水平及磷酸化的色氨酸/苏氨酸蛋白激酶(phosphorylation of serine/threonine kinase Ak,P-Akt)的表达水平进行检测。所得实验数据运用SPSS13.0统计软件进行分析,取P<0.05具有统计学差异,P<0.01具有显著差异。结果:1 MTT分析结果示,蛇床子素可以对PC-3细胞的增殖产生抑制作用;随药物干预时间延长及药物浓度增加,抑制率逐步增大(P<0.05),呈浓度与时间依赖关系。2流式细胞术结果显示,使用不同浓度的蛇床子素对PC-3细胞进行干预后,各实验组PC-3细胞与对照组相比G0/G1与S期细胞均减少,G2/M期细胞均增多,差异具有统计学意义(P<0.05),证明蛇床子素可以将PC-3细胞阻滞于G2/M期。流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率分别为:2.87%、10.82%、22.05%和33.33%。除了25u M组与对照组之间不具备统计学差异(P>0.05),其余各组之间均具备统计学差异(P<0.05)。进一步进行组间的相互比较,均具备统计学差异(P<0.05),即蛇床子素可以诱导PC-3细胞凋亡,随着蛇床子素的浓度的增加,其作用越明显。3蛋白印迹法结果显示,使用不同浓度蛇床子素对PC-3细胞进行体外干预后,各实验组PC-3细胞中P-Akt及PI3K的p85、p110二个亚基的表达水平均下降,与对照组相比,具有统计学差异(P<0.05)。各实验组组间相互比较,p110、p85及P-Akt的表达水平随浓度的增高逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。即蛇床子素可以下调P-Akt及p110、p85的表达,其抑制表达水平的作用与蛇床子素浓度呈正相关。结论:1蛇床子素在体外具有抑制PC-3细胞增殖的作用,其作用与蛇床子素的浓度及干预时间呈正相关;蛇床子素可阻断PC-3细胞周期,并产生G2/M期阻滞。2蛇床子素在体外具有诱导PC-3细胞凋亡的作用,其机制可能与下调PI3K/Akt信号通路中P-Akt及PI3K的p110、p85二个亚基的表达水平有关,推断蛇床子素通过下调p85、p110及P-Akt的表达水平阻断PI3K/Akt信号通路是其作用机制之一。