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转移因子(transfer factor,TF)由白细胞中具有免疫活性的T淋巴细胞产生,分子量小,化学本质为小肽与寡聚核苷酸复合物。本试验通过采集健康的猪脾脏,透析法制备非特异性TF,经检测TF,结果蛋白反应阴性、多肽含量等于0.615mg/ml、OD260/OD280为2.35,核糖含量测定45.2(ug/ml)。结果与资料报道TF质量控制标准相一致。通过生物学试验检测TF,结果显示:TF无毒、无热源性、无过敏性,巨噬细胞吞噬中性红现象明显,E-玫瑰花环结花率升高,说明TF具有免疫功能活性。本研究采用ELISA、流式细胞技术、全自动血细胞分析仪检测了试验猪TF配合疫苗注射,不同时间检测猪口蹄疫、圆环病毒抗体的变化,淋巴细胞数和比率的变化,T细胞亚群的变化,在免疫应答调控中起重要作用的细胞因子(IL-2和IFN-γ)分泌量的变化。在此基础上,提出降低猪圆环病毒疫苗使用剂量可行性,紧急预防猪口蹄疫配合TF的必要性。本研究共分为以下四个部分:第一部分转移因子制作转移因子(TF)制作工艺是:用猪脾置入捣碎机捣碎匀浆后冷冻、融化、冻融6-8后透析,透析液经理化性质和生物学特性符合要求即为合格制品。第二部分转移因子的免疫增强效果符合要求的转移因子作为一种安全、经济、使用方便、高效的疫苗佐剂显示巨大的免疫增强效果,具体表现为:用原液的TF,防疫口蹄疫疫苗同时肌注转移因子3ml,第二天再注射3ml转移因子,能提高猪口蹄疫抗体含量,即从注射后7d的70ng/L左右至35日龄上升到300ng/L以上;可以提高血液淋巴细胞比率、淋巴细胞数;可提高淋巴细胞分泌IFN-γ,可促进淋巴细胞分泌IL-2;分泌IFN-γ时间较短,本试验结果为注射后7日最高;淋巴细胞分泌IL-2时间较长,28日达到最高。第三部分转移因子可作为疫苗佐剂,减少疫苗使用量用转移因子原液,12日龄仔猪防疫猪圆环病毒疫苗1.2ml同时肌注转移因子3ml,第二天再注射3ml转移因子,7-35日龄时间段,能达到防疫2ml圆环病毒疫苗同样效果,即转移因子作为疫苗佐剂使用显示的巨大的免疫增强效果;同样用转移因子原液制品,12日龄仔猪防疫猪圆环病毒疫苗0.9ml同肌注转移因子3ml,第二天再注射3ml转移因子,与单防疫2ml圆环病毒疫苗相比,前者一些指标效果不及后者,且差异显著,有统计学意义(P<0.05)。第四部分转移因子可提高猪外周血CD4~+细胞数量及CD4~+/CD8~+比值防疫猪口蹄疫疫苗2ml配合肌肉注转移因子3ml,第二天再注射3ml转移因子;对照组仅肌肉注猪口蹄疫疫苗2ml,7、14、21日龄检测结果显示:T淋巴细胞亚群CD4~+T细胞百分数14日龄达到最高,CD4~+/CD8~+比值也是最高,随后稍下降;相同日龄,试验组比对照组CD4~+T细胞及CD4~+/CD8~+比值都高,试验组与对照组差异显著,有统计学意义(P﹤0.05),即转移因子可提高猪外周血CD4~+细胞数量及CD4~+/CD8~+比值。